正文描述:《GBT17811-1999 动物蛋白质饲料消化率的测定 胃蛋白酶法.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB/T17811-1999前言本标准等效采用美国公职分析化学家协会(AOAC)(1995年版)(动物蛋白质饲料的胃蛋白酶消化率测定方法过滤法》。在技术内容上,原方法中所用的“恒温搅动器”,根据实际情况改用“恒温平转摇床”;再则,限于国内试剂条件,选用市场上易购的胃蛋白酶试剂(1:3000)代替原方法指定的胃蛋白酶试剂(1:10000)o本标准由中华人民共和国国内贸易部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由国家饲料质量监督检验中心(武汉)负责起草。本标准主要起草人:屈利文、钱防。.www.bzxzk.com.中华人民共和国国家标准动物蛋白质饲料消化率
2、的测定GB/'r17811--1999胃蛋白酶法Determinationofdigestibilityinanimalproteinfeeds-Pepsinmethod1范围本标准规定了动物蛋白质饲料消化率的胃蛋白酶测定方法本标准适用于所有动物性蛋白质饲料,不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率的胃蛋白酶测定方法。2引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6432-1994饲料中粗蛋白测定方法GB/T6433-1994饲料粗脂肪
3、测定方法GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法3方法原理脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液,在恒温、持续不断地搅拌下消化16h,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白含量。同时,测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白含量。4试剂本标准所用试剂,除特殊说明外,均为分析纯实验室用水应符合GB/T6682中三级水的规格4门0.20胃蛋白酶溶液:将6.1mL浓盐酸稀释至1000mL水中(溶液pHl-2),加热至42^-45'C,加入2g活性为1:10000生化级胃蛋白酶〔若活性不是1e10000,可使用活性1:3000生化级胃蛋白酶‘〕(不可使用非生化级胃
4、蛋白酶),应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升201UD,并缓慢搅拌直至溶解勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热。临用前配制。4.2乙醚4.3丙酮。4.4定氮试剂:按GB/T6432中试剂及配制方法规定。采用说明:1)Ac)AC中指定为t:10000国家质it技术监督局1999一08一10批准2000一02一01实施.www.bzxzk.com.GB/r17811-19995仪器、设备51恒温式平转摇床,〕:温控范围20^-50'C,水浴式或空气浴式均可,转速可调(15^300r/min).52实验室用样品粉碎机53索氏抽提器、脱脂设备:按GB/T6433中
5、仪器、设备规定。定氮仪器、设备:按GB/T6432中仪器、设备规定。;.;实验室常用仪器、设备。6试样制备取具有代表性试样,用四分法缩分至200g,然后粉碎至全部过。.90mm孔筛(2。目),混匀装于密封容器,保存备用。7测定步骤7.1脱脂称取1-2g试样用乙醚(4.2)脱脂(含脂肪小于1%可不脱脂,含脂肪100---10%建议脱脂,含脂肪大于10%则必须脱脂)。脱脂方法可参照GB/T6433中粗脂肪抽提方法进行。脱脂后的样品需烘干。了.2胃蛋白酶消化称取脱脂烘干(7.1)后的样品若干克(精确至。.0002g,含氮量约5-80mg)于250ml带盖磨口瓶中,加150m
6、l新配制的并已预热至42.45℃的胃蛋白酶溶液(4-1),要确保样品完全被胃蛋自酶溶液浸湿,盖紧瓶盖,将瓶夹于恒温摇床(5.1)上,于45℃恒定搅动16h进行保温消化。7.3消化残渣的处理从搅动器上取下磨口瓶,呈450角放置,让残渣沉淀15min以上,随后在铺有快速滤纸的布氏漏斗上抽滤,先用少量水将瓶盖上的残渣洗至滤纸上,再将磨口瓶保持沉淀时的角度移至布氏漏斗上,慢慢倾出内容物,使之通过滤纸后形成连续的细流,避免任何不必要的搅动。液体通过滤纸的速度应与倾入的速度相同。当上层液体通过滤纸后,于瓶中加人15mL丙酮,用拇指盖住瓶口剧烈振摇,放开。再用拇指堵住瓶11,在滤纸
7、上方将瓶倒置振摇,放开拇指让丙酮和残渣流到滤纸上。再用一份15ml的丙酮进行洗涤,照上法振摇和倒出。检查瓶子,并用丙酮再次洗涤。当全部液体通过滤器后,用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁t:残渣两次,并抽干。从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸,无损地移人凯氏烧瓶中,并将凯氏烧瓶置于105C烘箱内烘干了.4粗蛋白的测定将上述(7.3)烘千的残渣按GB/T6432中方法测定粗蛋白含量(Wz)。同时,称取脱脂烘干(7.1)后的样品若干克(精确至。.0002g,含氮量约5^80mg),直接按GB/T6432方法测定脱脂未酶解的样品中粗蛋自的含量(w)。8分析结果的计算
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