医学细胞生物学复习

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1、细胞生物学要点王峰松fengsongw@hotmail.com安徽医科大学一、名词解释：4分/题X5题=25分二、填空题：1分/空X30空=30分三、选择题：1分/题X20题=20分四、问答题：10分/题X3题=30分主要内容细胞结构与功能：细胞核、染色体生物膜与细胞器的研究细胞质膜、内膜系统、线粒体等细胞骨架体系的研究微丝、微管、中间纤维、Septin细胞连接与细胞外基质细胞重要生命活动：细胞增殖及其调控细胞分化与肿瘤细胞细胞凋亡第一章绪论细胞生物学概念:细胞生物学是以细胞为研究对象,从显微水平、亚显

2、微水平、分子水平等三个层次，以动态的观点,研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的起源与进化和各种生命活动规律的学科。细胞学说的内容:一切生物体都是由细胞组成的；细胞是生命的基本组成单位；一切细胞只能来自原来的细胞(的分裂)提出者：德国的动物学家施莱登/Schleiden、植物学家施旺/Schwann病理学家/魏尔肖RudolfVirchow进行补充。第一个利用显微镜观察细胞的人：英国人胡克/RobertHooke第一个利用显微镜观察到活细胞的人：荷兰学者列文虎克/Leeuwenhoek支原体是最小最简单的细胞，直径只有

3、0.1-0.3μm。它具有的唯一细胞器是核糖体。自然界中最小最简单的生命体是病毒。原核细胞和真核细胞比较：(原核细胞主要为无丝分裂)第二章细胞生物学研究方法普通光学显微镜以可见光为光源，荧光显微镜的光源是以紫外线为光源，而电子显微镜是以电子束为光源。电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为透射电镜和扫描电镜。扫描电镜：观察样品表面的结构特征；透射电镜：观察样品的内部精细结构。一、显微成像技术：R=0.61λ/nSinα=0.61λ/NA分辨率:指能分辨出的相邻两个质点间最小距离的能力，这种距离称为分辨距离，它受到光衍射

4、性质的限制。分辨率由光源的波长、物镜的镜口角、介质折射率三种因素决定。λ=照明光源的波长。n=聚光镜和物镜之间介质的折射率，空气为1，油为1.5。α=样品对物镜角孔径的半角，sinα的最大值为1。数值孔径(又叫镜口率)是物镜和聚光镜聚光能力的主要技术参数，是判断两者(尤其对物镜而言)性能高低的重要标志。数值孔径越大，进入物镜的光越多；介质的折射率越大，则数值孔径越大，这些都可以使分辨率提高。放大率：最终成像的大小与原物体大小的比值。对显微镜来说，最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。显微镜类型分辨本领光源透镜成像

5、原理光学显微镜200nm可见光玻璃透镜利用样本对光的吸收形成明暗反差和颜色变化电子显微镜0.2nm电子束电磁透镜利用样品对电子的散射和投射形成明暗反差超薄切片：电子束穿透力很弱，须将标本制成40-50nm（小于100nm）的超薄切片。方法：透射电镜观察的组织细胞样本在超薄切片之前常用戊二醛和四氧化锇双重固定；丙酮逐渐脱水；环氧树脂包埋；切片；采用柠檬酸铅和醋酸双氧铀等进行染色。透射电镜的样品制备包括固定、脱水、包埋、切片、染色五个步骤。荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光。利用一定波长的光激发标

6、本发射荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置，或对发光物质进行定性和定量研究。直接发光物质：如GFP荧光蛋白；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光。FluorescenceMicroscopy/荧光显微镜细胞操作中用作固定液的是：醇类：甲醇，乙醇醛类：甲醛，戊二醛等二、细胞组分的分析方法：离心分离方法：利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有：差速离心法、密度梯度离心法。差速离心：利用不同离心速度所产生的不同离心力，将亚细胞组分和各种颗粒进行分开的方法

7、。密度梯度离心：利用各组分在介质中的沉降系数不同，使各组分形成区带。介质溶液是具有密度梯度、高溶解性和化学惰性的溶液。分为速度沉降和等密度沉降两种，前者主要用于分离密度相近而大小不一的组分，后者用于分离不同密度的细胞成分。Cellfractionationbycentrifugation.Repeatedcentrifugationatprogressivelyhigherspeedswillfractionatehomogenatesofcellsintotheircomponents.Ingeneral,thes

8、mallerthesubcellularcomponent,thegreateristhecentrifugalforcerequiredtosedimentit.Typicalvaluesforthevariouscentrifugationstepsreferredtointhefigurearelowspeed:1,000timesgra