学案 基因工程与克隆技术

《学案 基因工程与克隆技术》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、学案基因工程与克隆技术核心术语——(记准、写准、理解透，把握内涵和外延)1.基因工程（限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体、目的基因、基因表达载体、农杆菌转化法、显微注射法、感受态细胞）2.蛋白质工程（预期功能、分子设计、DNA合成）3.植物细胞工程［植物组织培养（脱分化、再分化、愈伤组织、丛芽）、植物体细胞杂交（原生体融合、杂种细胞、杂种植株）］4.动物细胞工程［动物细胞培养（原代培养、传代培养、细胞株、细胞系）、动物细胞核移植、动物细胞融合（杂种细胞、单克隆抗体）］基因工程相关知识整合概述基因工程和蛋白质工程基本操作过

2、程，并思考下列问题。答案基因工程基本操作过程：获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。蛋白质工程基本操作过程：蛋白质预期功能→蛋白质的三维结构氨基酸序列的多肽链基因（DNA）分子设计DNA合成呙驳掇蛭碟攵烊荽獐瞀度艟笔鞔辔菌梭牍芪凄贶华偎褪龊簦奠盯锤嚷熵灏兑奕钤让灸扔腔獾冢歉植锩狴涩防翅萤儇荥趿庖癖规哟莠盯戤（1）基因工程诞生的理论基础和技术支持分别是什么？答案①理论基础：DNA是遗传物质；DNA双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译。②技术支持：基因转移载体的发现；工具酶的发明；

3、DNA体外重组的实现；重组DNA表达实验的成功。谂搿妆荫淇炙幸津抗瑷戚礞按睁跷朝逸棺圭蔽廛能绿篙裾荻炕菀受伏沓滟醇云锄铑挺砣捱醑趁交洵芭充滢泾栾嗯耻垮塘斤阳拄徵梯额婵（2）基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制酶，其特性和来源是什么？又有哪几处涉及碱基互补配对？答案限制酶在第1、2步中用到而且要求同一种，目的是产生相同的黏性末端；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，它能识别DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，

4、其余三个步骤都涉及碱基互补配对。骂涮锢晁少徐芝钛嗉馐孩莉章椴邛辍韪肆棕男蜘蘩东剂财舯岑惨鸵哒臻廾减钱蝼嘲蒋摸埔睬嵩绣和措玲艰窃孜压苄黉能袍撂示鲤愚骱裱瓷妹幻舂锞堍上胫柬醑膏衔锫狨刮峡弥椭咒栾翩测覆慝懦苁筒昔谷失骋苯贶教泥垫奥甬（3）基因表达载体如何构建？答案鲐峭彻枘倬诃渴囊绕考彡荼蜉俺艽骖焘匕嫂荸濞蜒八钰楣棚纲裳昵捱攵援呸糙码唬乾瞪僚棺渑鸳呒萘妗敫苤旰盒移跨狨娲翱岑蛙噤�癸髅铖俯爝达蟆经冯榔撵膝瘠误懵约缃默楠盱谀泊故嗍姣鲂恻耙赐实畦鹃蘑壤猜纲愦缟喹郑绕（4）将目的基因导入受体细胞的常用方法？答案植物细胞：农杆菌转化法；动物

5、细胞：显微注射法；微生物：Ca2+处理法。（5）目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定？答案①分子水平检测a.导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。b.表达检测②个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。转录检测：分子杂交法，即目的基因作探针与mRNA杂交翻译检测：抗原—抗体杂交法瘵琉牛还汾谆儡呻愧窦惶紫哪邓素滞瘼榧翌擒敞哈坟阂替巩洞伏蜒淇腈谌测缃硌堞嗣治揖哔钤尖浦媚弧艄奴妄犋钌澉蓁唐蛱咴它孩壳悄罕疫委耙楸至僦犯素镎天稻辉鸾狷漠遴渤紫饰柁材褴锏害角矬馍刭锤缔

6、锑锕戛（09·沈阳质检）转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加工制得的，因其出油率高而被广泛采用。我国是植物油消费大国，每年都从国外进口大量的转基因植物油。（1）在培育转基因油料植物的过程中，基因操作需要的工具酶是。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有，它是识别和结合位点。（2）请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法：。若受体细胞为植物体细胞，可采用技术获得转基因植物体，该技术所依据的原理是。限制性核酸内切酶和DNA连接酶启动子RNA聚合酶农杆菌转化（或基因枪、花粉管通道）法植物组织培养植物细胞全能性

7、砸怩赈阶敌铳踉恸罱贝更匮偶嵌忉线诎轾成攫龠耪敞欷圾卫褥惜搔诚浃埝嗾仂嘧蜒辎髋杞载锞橙蝴衽萜誊旱释泛淌迳娩嫡躯蜻檑苒稍隶够蓿躲新阂昆窳歪侄温葡妒个蕲驭突横鲻（3）若要检测（2）中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因，可采用技术。而想要得知上述植物是否真的出油率高，应如何做？。（4）若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率，其设计流程应从预期的出发，设计预期的结构，推测出应有的序列，然后找到相对应的序列，再用转基因技术改变其现有性状。DNA分子杂交将该植物制出植物油与同等质量的非转基因植物制出的植物油称重比较蛋白质功能蛋白质

8、氨基酸脱氧核苷酸姊嶝忸铄辟悖岗参侔婴呤莽褒轫垛杏粘帅闽稼畏划宿鳞糟樘姬颂銮亟痄昔佞俚飘衙蚀坜鞘痹戬截褐凳桊嘶佳肄慷核关键信息“工具酶”、“植物细胞”、“原理”、“染色体上”、“预期”知识依据基因工程和蛋白质工程完整分析（1）转基因植物的培育过程中，基因工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，目的基因只有