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时间:2019-07-24
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1、类脂粒和易染颗粒染色法一、实验材料实验菌株:从SBR(SequencingBarchReactorActivatedSludgeProcess)反应器,经过1个月的厌氧好氧交替驯化,形成除磷能力很强的聚磷菌群。类脂粒染色原理细胞内含脂类储藏物的细菌。PHA聚羟基脂肪酸酯,在C/N高的环境中更易形成,用革兰氏染色不能使这类物质着色,被误认为是空胞。若用脂溶性染料染色,可将其与细胞内的空胞区别。类脂粒染色药品1)类脂粒染色液:染色液:0.3%苏丹黑染液0.3g苏丹黑,溶于100ml的75%酒精;褪色剂:二甲苯;复染剂:0.5%番红染液。操作步骤1.制片:涂片---
2、干燥---固定;2.初染:在制片上滴0.3%苏丹黑染液,染10min,水洗,吸干;3.脱色:用二甲苯冲洗涂片至无黑色素洗脱;4.复染:用0.5%番红复染1-2min,水洗,吸干。5.镜检:类脂类呈蓝黑色,菌体其他部分呈红色;易染颗粒染色易染颗粒是细菌储藏的物质;主要是多聚磷酸盐,随着菌龄的增加而变大,易被蓝色燃料染色,而呈红色或紫色不呈现蓝色,故名易染颗粒,如用吕氏美兰单染5min,易染颗粒呈深蓝色,菌体呈淡蓝色,也称Albert易染颗粒染色法。易染颗粒染色药品甲液:甲苯胺蓝0.15g乙液:碘2.0g,孔雀绿0.2g,KI3.0g,冰醋酸1ml溶于300ml,
3、95%酒精。易染颗粒染色步骤1、滴甲液于涂片上染色5min,倾去;2、滴加乙液冲去甲液,再染1min,水洗。3、吸干、镜检。4、易染颗粒呈黑色,菌体呈绿色或浅绿色。类脂粒实验报告描述厌氧末期和好氧末期,2种方法获得的染色结果。(两种时期都颜色是什么?聚磷菌体多少?)
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