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时间：2019-07-24
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1、实验5分光光度法测定青菜中的叶绿素江南大学《食品化学》课程小组一、目的了解叶绿素的分子结构、性质，理解叶绿素性质不稳定的根源，从而提高解决青菜类蔬菜在加工、储藏等过程中出现问题的能力。掌握食品中某些有效成分的提取、分离以及测定方法。二、仪器及材料天平、组织捣碎机、水循环真空泵、抽滤瓶、滤纸、布氏漏斗、容量瓶（1000mL、100mL）、分液漏斗2个、尖嘴管、铁架台、铁圈2个、分光光度计；青菜叶、碳酸钙、丙酮（80%）、乙醚、无水硫酸钠。三、原理总叶绿素=7.12A660.0＋16.8A642.5叶绿素a=9.93A660.0－0.777A642.5叶
2、绿素b=17.6A642.5－2.81A660.0转移叶绿素乙醚溶液测定青菜叶叶绿素丙酮溶液组织破碎吸光度含量四、实验步骤青菜叶+CaCO3+丙酮，捣碎匀浆抽滤滤液85%丙酮洗涤残渣滤液比色，计算叶绿素含量定容乙醚萃取洗去丙酮定容五、注意事项使用乙醚萃取时，需在通风橱中操作，实验前检查好分液漏斗的密封、通畅性，萃取时勿激烈振摇，以防产生乳化层叶绿素遇光照和高温不稳，在提取过程中必须控制好这些因素，尽可能在低温、弱光下进行，并缩短实验时间，防止叶绿素的破坏使用分光光度计时，先要预热；测定时要用乙醚作空白六、思考题1、测定叶绿素a、b含量为什么要选用红光
3、的波长？2、在破碎青菜叶组织时，为什么要加入碳酸钙或碳酸钠？3、为什么叶绿素测定时应尽量可能在低温和避光的条件下进行？4、叶绿素a和叶绿素b的结构有何不同？5、叶绿素在酶、热、酸的作用下会发生什么变化？
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