吸附层析——樊启弟

吸附层析——樊启弟

ID:40139259

大小:3.14 MB

页数:57页

时间:2019-07-23

吸附层析——樊启弟_第1页
吸附层析——樊启弟_第2页
吸附层析——樊启弟_第3页
吸附层析——樊启弟_第4页
吸附层析——樊启弟_第5页
资源描述:

《吸附层析——樊启弟》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库

1、吸附层析制作人:樊启弟LOGO(AdsorptionChromatography)纲要概述层析法分类层析的由来与发展层析分离方法的选择吸附层析吸附柱层析薄层层析Key:原理、吸附剂选择、洗脱剂选择、操作概述一、层析的由来与发展1901年,俄国植物学家茨维特将植物色素提取液加到装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部,继而以石油醚淋洗柱子,结果使不同的色素在在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带。混合色素通过碳酸钙微粒被分离成不同色带的现象,像一束光线通过棱镜时被分离成不同色带的光谱现象一样。1906年在一篇论文中将这种方法正式命名为色谱法,色谱法由此得名。1931Kuhn,Lederer

2、用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重视。1938Izmailov,Shraiber最先使用薄层色谱法。1938Taylor,Uray用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。1941Martin,Synge提出色谱塔板理论;发明液-液分配色谱;预言了气体可作为流动相(即气相色谱)。1944Consden等发明了纸色谱。1949Macllean在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段。1952Martin,James从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。1956VanDeemter等提出色谱速率理论,并应用于气相色谱。1957基于离

3、子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。1958Golay发明毛细管柱气相色谱。1、原理色谱法(Chromatography),也称色层法或层析法(后文中我们称之为层析法)。此种方法基于混合液中各组分的分子极性、分子大小与形状、吸附力、亲和力等物理化学性质的差异,导致各组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,组分在两相间进行连续多次分配,从而彼此分离。层析不只是分离技术,也是一种分析方法。2、层析过程逆流分溶原理示意图物质Y(Kd=1)的分配情况溶剂A物质Z(Kd=3)的分配情况溶剂B总量总量总量总量总量总量平衡后转移1转移2转移3分溶管号转移4上相转移下相转移上相转移管中蛋白质

4、总量物质Y物质Z分溶曲线管号有效分配系数(Keff)某一物质在A相中的总量某一物质在B相中的总量3、层析方法的共同特点:①层析分离体系都有流动相和固定相两个相。②层析过程中,流动相对固定相作连续的相对运动。③被分离样品在两相中具有不同的作用力,各组分混合物在流动相的带动下通过固定相,实现分离。二、层析法分类1、按两相物理状态分类:用气体作流动相—气相层析用液体作流动相—液相层析固定相可以是液体或固体,便可组合成四种主要层析类型:气-固层析(gas-solidchromatography,GSC)气-液层析(gas-liquidchromatography,GLC)

5、液-固层析(liquid-solidchromatography,LSC)液-液层析(liquid-liquidchromatography,LLC)2、按固定相的形态分类(1)柱层析(columnchromatography)固定相装在柱内即为层析柱,根据层析柱的尺寸,结构和制备方法不同,分为填充柱层析和毛细管或开管柱层析。(2)平板层析(planarchromatography)固定相呈平板状,包括薄层层析、薄膜层析和纸层析。固定相以均匀薄层涂敷在玻璃板、塑料板或有机薄膜上,或将固定相直接制成薄板状,称为薄层层析(TLC);用滤纸作为固定相或固定相载体的层析为纸层析

6、(PC)。3、按分离过程物理化学原理分类(1)吸附层析(absorptionchromatography)用固体吸附剂作层析的固定相,利用样品各组分在吸附剂上吸附力的大小不同,而将各组分分离。如气-固吸附层析和液-固吸附层析。(2)分配层析(partitionchromatography)用液体作固定相,样品组分(溶质)在固定相中溶解、吸附或吸着能力不同,因而在两相之间分配系数不同将样品组分分离。(3)离子交换层析(ion-exchangechromatography)(4)凝胶层析(gelchromatography)(5)亲和层析(affinitychromatograp

7、hy)三、层析分离方法的选择1.对于蛋白质、酶、核酸等生物大分子,由于它们分子量大、易失活以及具有生物专一和亲合性等特点,选用多糖基质(如纤维素、葡聚糖、琼脂糖等)离子交换层析、疏水作用层析、凝胶层析和亲合层析等;2.对于生物小分子的代谢物,由于它们分子量小、结构和性质比较稳定、操作条件不太苛刻,采用吸附、分配和离子交换层析进行分离较为适宜。3.氨基酸、有机酸、核苷酸等一些离子型化合物的生产多用离子交换层析分离;4.抗生素、生物碱、萜类、色素等次级代谢产物多采用吸附层析或反相分配层析分离。吸附层析1.固

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。