《血痕法医学》ppt课件

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1、血痕检验中山医学院法医物证教研室李建金概述肉眼检查血痕预试验血痕确证试验种属鉴定血痕的个人识别血痕（bloodstains)血液在人体外干燥后形成的斑迹称为血痕血痕检验是法医物证检验中最常遇到和最重要的项目。血痕的特点：现场血痕的分布，形状可推断性质，被害人死亡原因，案件发生的时间，地点等血液一旦离开人体降解和腐败速度迅速应及时提取和送检血痕检验的目的和要求是否为血痕是否为人的血痕人血痕的个体识别(ABO，……DNA)人血痕的其它检验（性别、部位、时间、量等）检验程序肉眼检查血痕的部位血痕的颜色:大概推断出血时间血痕的形状:滴状、流柱状、擦拭状、喷溅

2、状、血印痕、血泊、血水、隐蔽血痕血痕的范围：估计出血量颜色变化：Hb---变性Hb---正铁血红素---血红素---血卟啉暗红---红褐-------褐绿--------褐黄---灰色溶解度：时间越长越难溶解。氯的渗透：血痕中的氯随时间经过，逐渐向基质周围渗透，时间越长，则渗透的范围越大。血痕的形状血痕预试验预试验（preliminarytest)目的：从大量可疑血痕中筛除不是血痕的检材意义：阳性结果仅表示可能是血但阴性结果可断定不是血痕血痕预试验联苯胺试验1酚酞试验2氨基比林试验3孔雀绿试验4一、联苯胺试验原理：血红蛋白具有过氧化物酶的活性，可使过氧化氢

3、释放出新生态氧，将无色联苯胺氧化为蓝色（联苯胺蓝）。H2OHb/hematinPoH2O+联苯胺[O]联苯胺蓝（无色）　　（紫蓝色）联苯胺试验操作剪取检材滤纸轻擦斑痕依次滴加冰醋酸联苯胺无水乙醇饱和液过氧化氢*阳性结果：紫蓝色可能是血痕video二、酚酞试验原理与联苯胺试验相同，红色为阳性。三、无色孔雀绿试验原理：新生态氧将无色孔雀绿氧化成孔雀绿。青蓝色为阳性。四、氨基比林试验原理与联苯胺试验相同，紫蓝色为阳性。确证试验Conclusivetest目的：确证检材是否为血检测检材中是否有血红蛋白或其衍生物阳性结果可确证为血痕，但阴性并不能否定血痕灵敏度低，

4、检材经污染后常呈假阴性确证试验1血色原结晶试验3光谱检查2氯化血色素结晶试验一、血色原结晶试验原理：血红蛋白在碱性溶液中分解为正铁血红素和变性珠蛋白，还原剂将正铁血红素还原为血红素，血红素与变性珠蛋白、其它含氮化合物结合形成血色原结晶（樱红色）。二、氯化血色素结晶试验原理：血红蛋白（酸性下）--正铁血红素+氯离子--氯化血色素结晶（褐色）。三、光谱检查原理：血红蛋白及其衍生物均是有色物质，具有吸光性，在分光镜下可见特定吸收线（黑色）。种属试验种属鉴定（speciesidentification)血痕的种属试验是血痕鉴定的一个关键必须确定血痕是人血后才能做D

5、NA分析种属试验沉淀反应免疫扩散试验抗人球蛋白消耗试验抗人血红蛋白胶体金试验间接酶联免疫吸附试验DNA检验沉淀反应（percipitationreaction)原理:可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存在的条件下发生特异性结合，当抗原与抗体的比例适合时，经一段时间可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物沉淀。沉淀反应的条件抗血清的制备：血痕的种属鉴定常采用人的血红蛋白和人的血清蛋白免疫动物而获得相应的抗血清，即抗人血红蛋白血清和抗人血清蛋白血清。抗血清须具备种属特异性和器官特异性种属特异性抗体只对某一物种的抗原发生特异性反应器官特异性抗体只对某一器官成分发生特异反应

6、交叉反应：抗体除与其相应的抗原发生特异反应外，有时会与其他抗原发生交叉反应。产生的原因：(1)人与动物血清蛋白有共同的抗原。(2)人与有些动物血红蛋白分子结构差异小。解决方法：①吸收法除去交叉反应性抗体②稀释抗原。将抗原溶液稀释500～l0000倍通常类属反应容易消除，近亲反应难以消除(二)血痕浸出液的制备1．血痕浸出液的制备生理盐水浸泡血痕2～12h基本要求：澄清、透亮、淡稻草黄色离心沉淀，吸取上清作沉淀反应。陈旧血痕的蛋白不易溶解，可适当延长浸泡时间三）影响沉淀反应的因素温度、PH、离子强度、抗原抗体的浓度和比例等。环状沉淀试验(ringpercipi

7、tation)原理：可溶性抗原与相应抗体结合相遇且比例适合时，形成抗原-抗体复合物沉淀，在抗原与抗血清的界面出现白色沉淀环。方法：反应管中加入抗血清血痕浸出液层叠于抗血清之上室温静置1h后观察注：制备浸出液的浓度：1/1000左右抗体的制备（免疫家兔而得）抗人血红蛋白抗体抗人血清抗体阴性对照阳性对照检材是人血空白对照阴性对照已知人血痕检材血痕动物血痕空白检材兔抗人血红蛋白血清兔血清抗人血红蛋白胶体金试验胶体金吸附免疫球蛋白，固定在硝纤膜上，与相应抗原结合后再与相应抗体结合，胶体金颗粒聚集，呈现红色。适用于微量检材胶体金抗原抗体(-)仅在控制区出现一条红色带

8、而在测定区无红色带的出现为阴性(+)在控制区和测定区都有红色线的出