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1、同工酶、巨分子酶 临床应用和图谱分析酶是以多种形式存在在血液中的，如酶原、糖基化修饰、磷酸化、酶单分子的聚集、与免疫球蛋白结合、与脂蛋白结合、与其他蛋白质结合等等形式。酶多种形式的存在常常会引起检测结果的混乱，并导致电泳图谱的异常，引起结果的误报。同工酶的定义3、分子结构不同1、同工酶是以多种分子形式存在于机体的酶2、催化功能相同二、检测同工酶的目的1、检测同工酶活力比单测定酶的总活力更具有脏器特异性和高灵敏性等优点，因而提高了临床诊断价值2、早期诊断某些疾病，阳性率高，特异性强。3、可以估计
2、病情严重性和判断预后。目前广泛地应用于临床的同工酶：乳酸脱氢酶同工酶Lactatedehydrogenase,LDH肌酸激酶同工酶Creatinekinase,CK碱性磷酸酶同工酶Alkalinephosphatase,ALP天冬氨酸氨基转移酶Aspartatetransaminase,ASTγ-谷氨酰转移酶γ-glutamyltransferase,GGT-淀粉酶同工酶-Amylase,AMY同工酶的最主要特征是由遗传基因决定的一级结构不同的多种形式的分子。正是由于一级结构的不同，高级结构
3、（构象）也就不同；因此一种酶的各个同工酶在化学、物理化学、生物学等方面的性质也就有所差异。这些差异就提供了分析和鉴定同工酶的理论基础。同工酶鉴定同工酶的分析可大致分为两步：1.精确地分离出各同工酶组分；2.测定酶的总活性和各同工酶组分的活性。对于新发现的同工酶组分还必须鉴定其真伪、排除矫作物。在研究同工酶的所有方法中，电泳法的使用最为广泛。因为此法简便、快速、分离效果良好，并且一般不会破坏酶的天然状态。电泳技术1809年俄国物理学家首先发现了电泳现象,直至1937年瑞典科学家利用U型管建立了分离
4、蛋白质的界面电泳之后,开创了电泳技术新纪元.各种电泳技术及仪器相继问世,先进的电泳仪和电泳技术及丰富多彩的电泳形式使其应用什分广泛.电泳技术除了应用于小分子物质的分离分析外,最主要用于蛋白质﹑核酸等生物分子研究.由于电泳法设备简单,操作方便,具有高分辩率及选择性特点,已成为医学检验中常用的技术.几种常用同工酶临床意义一．肌酸激酶同工酶（creatinekinase,)简称CK.国际酶学委员会的统一编号为EC2.7.3.2，系统命名为ATP；肌酸磷酸转移酶）组织CKU/克湿重CK-MM%CK-MB
5、%CK-BB%骨胳肌328099<10(腓肠肌)骨胳肌189499<1<1(肋间肌)心肌62087130(乳头状肌)心肌40276~88220~2(右心房)脑20000100回肠1613196结肠1373~4<196胃1222~41~494~95（二）CK同工酶在人体组织的分布肌酸激酶(CK)同工酶的组成CK是由M和B两种亚单位组成的二聚体,在细胞质内质内共有三种同工酶：CKMM,CK-MB和CK-BB。在细胞线粒体内还有另一种同工酶，称为CK-Mt。这几种同工酶的分子量虽然相同，但免疫特性不同
6、，电泳迁移率也不同。CK同工酶和巨CK的电泳迁移位置（三）CK同工酶的临床意义1．急性心肌梗死（1）CK总活性在急性心肌梗死后的4小时便开始升高，至20-30小时达高峰，3-5天后下降至基础水平。此酶为诊断心肌梗死的一个极灵敏指标。4小时20-30小时3-5天（2）CK-MB主要存在于心肌细胞内，急性心肌梗死后先于CK总活力1-2小时升高，12-20小时达峰值，如无并发症3天后回复至正常水平，如果胸痛病人患者在48小时内CK-MB尚在正常水平活力不足总CK的2%，即可排除急性心肌梗死的诊断。1-
7、2小时12-20小时3天后（1）肌营养不良骨骼肌中富含CK，以CK-MM为主，故各型肌营养不良均可引起CK活力升高，发病年龄越早，予后也越差。其中半数以上可检出CK-MB，（CK-MB/CK＜5%)而心电图都无阳性发现，说明并非心肌受累。2．神经肌肉系统疾病（2）肌肉创伤及肌肉注射肌肉创伤可使CK活力升高，无CK-MB出现，CK-MM是骨骼肌损伤的特异指标。肌肉注射青霉素，利血平，肾上腺素等药物期间，约有1/3的病人在12-48小时内总CK活力升高，一般可持续3-6天，检测CK同工酶，可见主要是
8、CK-MM占优势，提示这是肌肉创伤所至。3．神经系统疾病约有半数脑血管病患者CK活力明显升高。CK同工酶仅能检出CK-MM，而CK-BB含量甚微，这是由于CK-BB难于透过血脑屏障之故。CK亚型CK-MM亚型:MM3─基因型、组织型M2M2MM2─-LysM1M2MM1─-2LysM1M1CK-MB亚型:CK-MB1－-2Lys,CK-MB2（组织型）电泳法正常参考值：CK-MM142±6%CK-MM231±3%CK-MM319±5%CK-MM3/CK-MM10.5±0.2临床意义：CK-MM亚
