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《大蒜素对铜绿假单胞菌生物膜群体密度感应系统调控毒力因子表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、基金项目：国家自然科学基金(30772363)；重庆市自然科学基金(渝科发计字2007-340)SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(30772363)andNaturalScienceFoundationofScientificCommitteeofChongqing(2007-340)作者简介：林丽华，硕士研究生,主要从事细菌感染方面的研究,E-mail:linlihua1999@163.com通信作者：余加林，E-mail:yujialin486@sohu.com收稿日期：修回日期：大蒜素对铜绿假单胞菌生物膜群体密
2、度感应系统调控毒力因子表达的影响林丽华，余加林，卢起，刘官信（重庆医科大学附属儿童医院，重庆400014）摘要：目的通过体外测定铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）群体密度感应（QuorumSensing，QS）系统调控的毒力因子表达，比较大蒜素干预前后毒性因子表达的差异以及对铜绿假单胞菌PAO1成熟生物膜（biofilm，BF）的影响。方法应用ELISA法比较处理前后外毒素A的含量差异；利用弹性蛋白-刚果红染色的方法，测定处理前后弹性蛋白酶活性；用蒽酮-硫酸法测定鼠李糖脂；荧光酶标仪检测青脓素含量变化；利用激光共聚焦显微镜观察干预前后大蒜素对铜绿假单胞成熟BF的影响
3、。结果大蒜素干预后与生理盐水对照组比较，外毒素A、弹性蛋白酶、鼠李糖脂和青脓素表达分别为由（19.630±0.573）pg/μl、（0.467±0.003）、（2.009±0.063）g/L、（9325.833±367.675）下降到（6.529±0.289）pg/μl、（0.032±0.001）、（0.269±0.009）g/L、（7819.167±111.800）。激光共聚焦显微镜观察可见生理盐水对照组细菌菌落云集呈蘑菇状分布，干预组黏附的细菌稀疏散在平坦分布。结论大蒜素可抑制铜绿假单胞菌群体密度感应系统调控毒力因子表达，减弱其毒力，干扰BF分化成熟。关键词：铜绿假单胞菌；群体密度感应
4、系统；毒力；生物膜；大蒜素中图法分类号：文献标识码：EffectsofallitrideonQuorumSensing-ControledVirulenceFactorsProductioninPseudomonasaeruginosabiofilmLINLi-hµa,YUJia-lin,LUQi,LIUGuan-xin(Children′sHospitalofChongqingMedicaluniversity,Chongqing400014)Abstract:ObjectiveQuorum-sensing(QS)systemisakeyregulatorofvirulenceandbi
5、ofilmdevelopmentinP.aeruginosa.AllitridewasexaminedinthisstudyforitseffectsonP.aeruginosavirulencefactorsandbiofilmformationinvitro.MethodsSensitivesandwichenzeme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)systemsforthequantificationofexotoxinA,Expressionofelastaseandpyoverdinwereassessedsemi-quantitativelyus
6、ingelastinCongoredandfluorescencerespectively.ProductionofrhamnolipidwasdeterminedbyH2SO4-anthroneanalysismethod,absorbanceat553nm;Scanningconfocallasermicroscope(CLSM)wasusedtostudytheeffectsofallitrideonmaturebiofilminvitro.ResultsAllitridedownregulatedvirulencefactors:exotoxinA,elastase,rhamnol
7、ipidandpyoverdin,productionofexotoxinA,elastase,rhamnolipidandpyoverdindeceasedfrom(9.630±0.573)pg/μl,(0.467±0.003),(2.009±0.063)g/l,(9325.833±367.675)to(6.529±0.289)pg/μl,(0.032±0.001),(0.269±0.009)g/land(7819.1
