毕业论文--甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的相关因子研究

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1、-5-：甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的相关因子研究甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的相关因子研究摘要：以甘蔗ROC22愈伤组织为材料，研究相关因子对甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的效应。结果表明：2,4-D3.0mg/L较利于胚性细胞团的诱导，诱导率为30.33%；KT0.5mg/L对胚性细胞团的继代增殖较佳，培养25天后的增殖倍数为38.8倍；培养日龄为15天和第4代的胚性细胞团增殖倍数较高，分别为42.06倍和44.33倍；先暗培养再光照培养对胚性细胞团的继代增殖较好，培养25天后的增殖倍数为35.05倍。关键词：甘蔗；组织培养；胚性细胞团；相关因子þStud

2、yofRelatedFactorsontheInductionandProliferationofEmbryogenicCellClustersinSugarcaneAbstract:ThecallusofsugarcanevarietyROC22wasusedasthematerialstostudyrelatedfactorsontheinductionandproliferationofembryogeniccellclusters.Theresultsindicatedthatitwasbettertoinduceembryogenicc

3、ellclusterswith2,4-D(3.0mg/L),andtheinductionratewas30.33%.ItwasbettertosubcultureembryogeniccellclusterswithKT(0.5mg/L),andtheproliferationtimeswas38.8afterculturefor25days.Theproliferationtimewashigherwhentheageofembryogeniccellclusterswas15daysor4thsuccessivetransfer,which

4、was42.06timesand44.33timesrespectively.Itwasbettertosubcultureembryogeniccellclusterswhenfirstdarkcultivationtoilluminationcultivation,andtheproliferationtimewas35.05afterculturefor25days.Keywords:Sugarcane;Tissueculture;Embryogeniccellclusters;Relatedfactors1前言甘蔗(Saccharumof

5、ficinarum)为禾本科甘蔗属，原产于热带和亚热带地区，是我国最重要的糖料经济作物之一。甘蔗种植面积占糖料种植面积的85%以上，产糖量占全国总产糖量的90%以上。广西是我国甘蔗种植面积最大之一的省份[1-2]。ROC22是广西目前种植的当家品种，具有高产高糖、易脱叶、抗性好的特性，深受蔗农喜欢。然而，甘蔗因常年连种而使品种退化，导致品质下降，产量降低。许多学者利用组培快繁技术，已通过以芽增芽、愈伤组织分化不定芽等途径进行了大量研究，但未曾对甘蔗胚性细胞团的诱导和增殖的相关因子进行系统的研究。胚性细胞团在愈伤组织的基础上产生，具有增殖快、分化率

6、高、成苗率高等优点[3-4]。本研究以ROC22愈伤组织为材料，研究相关因子对甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的效应，为今后进一步研究甘蔗诱变突变体和遗传转化等提供参考依据。2材料与方法2.1试验材料以甘蔗ROC22愈伤组织为供试材料，来自广西大学农学院植物组织培养中心本课题组。2.2试验方法2.2.1不同2,4-D浓度对甘蔗胚性细胞团诱导的比较试验-5-：甘蔗胚性细胞团诱导与增殖的相关因子研究以MS＋NAA0.2mg/L＋KT0.5mg/L为诱导培养基，分别添加2,4-D0mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L，每处理

7、30瓶，每瓶10粒黄豆大的愈伤组织，重复3次，培养25天后统计胚性细胞团诱导率，比较不同浓度2,4-D对甘蔗胚性细胞团诱导的影响。2.2.2不同细胞分裂素对甘蔗胚性细胞团继代增殖的比较试验以MS＋2,4-D3.0mg/L＋NAA0.2mg/L为继代培养基，添加不同种类和浓度KT(0.5mg/L，1.0mg/L)、CPPU(0.5mg/L，1.0mg/L)、TDZ(0.02mg/L，0.04mg/L)，比较不同细胞分裂素对甘蔗胚性细胞团继代增殖的影响。2.2.3不同培养日龄对甘蔗胚性细胞团继代增殖的比较试验以MS＋2,4-D3.0mg/L＋NAA0

8、.2mg/L＋KT0.5mg/L为继代培养基，比较不同培养日龄(15天，25天，35天，45天)的胚性细胞团对继代增殖的影响。2.2.4