示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量

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1、示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量指导教师权新军实验目的1、通过标准曲线的绘制及样品溶液的测定，了解示差分光光度法的原理及特点2、掌握UV-2450型紫外-可见分光光度计的使用方法实验原理一、紫外－可见分光光度法基本原理二、分光光度计基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程三、示差分光光度法的原理一、紫外－可见分光光度法基本原理紫外-可见分光光度法是指利用紫外-可见吸收光谱对物质进行定性和定量分析的方法。紫外-可见吸收光谱属于分子吸收光谱，由分子的外层电子跃迁产生。其中可见吸收光谱：波长范围400750nm，主要用于有色物质的定量分析。紫外吸收光谱：波长范围

2、200400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。物质的结构不同，紫外吸收光谱的形状不同，据此可进行结构鉴定。例如:不饱和脂肪族化合物在175~200nm处有吸收。芳香族化合物的苯环在紫外区有三个吸收峰，λmax=250nm，。定量分析依据朗伯-比尔定律：A＝lg（I0/It)=εbc式中A：吸光度；b：液层厚度，通常以cm为单位；c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L－１；ε：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度吸收法定量分析的依据。二、分光光度计的基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程光源单色器样品室检测器显示UV

3、-2450型紫外－可见分光光度计操作规程简介1.打开电源开关，打开电脑及软件，进入自检界面。2.单击确定开始自检，自检过程中不得打开样品室盖。3.完成自检后，单击波长扫描按钮，选择“方式”，设定波长及测量方式（Abs）4.将参比溶液放入参比池中，另一参比液放入样品池第一池内。点击自动清零键清零。5.取出样品池中参比，放入测量液，进行全波长扫描，找出最大吸收波长。6.取出测量液，将标准曲线的五个试样放入测量池中，打开定量分析界面，设定波长和测量方式Abs，测定各点吸收值，绘图。7.放入待测样品，测定。三、示差分光光度法原理普通分光光度法一般测定痕量组分参比溶液浓度为零即朗伯—比耳

4、定律只适用于稀溶液。示差分光光度法用于测定浓度较高组分用浓度稍低于待测溶液的标准溶液作参比设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs

5、为cs的标准溶液为参比溶液;2）测定一系列Δc已知的标准溶液的相对吸光度(ΔA)；3）绘制ΔA-Δc工作曲线；4）由测得试样溶液得相对吸光度ΔA，从工作曲线上求出Δc，根据cx＝cs+Δc即可求出试样浓度cx试剂与器材UV-2450紫外-可见分光光度计，石英比色皿（1cm），容量瓶（50ml），移液管（1ml、10ml），未知样品液。实验方法及步骤1.标准溶液的配制非那西汀标准溶液（100μg/ml）：准确称取非那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用2.吸收曲线绘制移取5.00ml非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中

6、，蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。3.绘制工作曲线分别取非那西汀标准溶液5mL，6mL，7mL，8mL，9mL，10mL分别于6个50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，以第一个溶液为参比，于最大波长处测定吸光度值，以ΔA对Δc作图绘制工作曲线。4.样品测定取一定体积样品溶液（浓度在40-60μg/mL）于50mL容量瓶中，于最大吸收波长处测定吸光度值。数据处理1.绘制非那西汀的吸收曲线2.绘制工作曲线3.在工作曲线上查出未知样中非那西汀的浓度Δc4.计算未知样中非那西汀的浓度cx5.完成实验报告并交给指导教师。