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《2020版高考生物总复习第38讲基因工程训练（含解析）新人教版》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第38讲 基因工程测控导航表知识点题号1.基因工程的基本工具12.基因工程的基本操作程序及应用3,4,73.PCR技术24.蛋白质工程65.综合考查5,81.(2019·山西太原月考)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有 和 。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是 。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两
2、类,即 DNA连接酶和 DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是 ,产物是 。若要在体外获得大量反转录产物,常采用 技术。 (5)基因工程中除质粒外, 和 也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 。 解析:(1)限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端,平末端和黏性末端。(2)为使两种不同酶切割之后能够相连接,所产生的黏性末端必须相同。(3)E.coliDNA连接酶可以连接黏性末端,T4DNA连接
3、酶可以连接两种末端。(4)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,常利用PCR技术进行大量扩增。(5)基因工程中可以选用质粒、λ噬菌体的衍生物及动植物病毒做载体。(6)当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca2+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒。答案:(1)平末端 黏性末端(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同(3)T4 E.coli(4)mRNA 单链DNA PCR(多聚酶链式反应)(5)动植物病毒 λ噬菌体的衍生物(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱2.(2
4、018·湖北武汉调研)含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题:(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是从 生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“DNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是 (填“基因组文库”“DNA文库”或“基因组文库和cDNA文库”)。 (2)含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有① ;②
5、 。 (3)利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90～95℃)、低温复性(55～60℃)、适温延伸(70～75℃)三个步骤构成一个循环,为使得DNA聚合酶能够重复利用,选用的酶应在 ℃处理后仍然具备催化活性。 (4)在PCR扩增目的基因时,为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记,反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的 (填“腺嘌呤核糖核苷酸”“dATP”或“ATP”)。 解析:(1)限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。两者的构建过程中均将目的基因与载体连接后导入受体菌群,因此均需用到DNA连接酶。(2)限制酶不切割原核细
6、胞自身的DNA的原因在于细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列;甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰。(3)PCR扩增目的基因时需要耐高温的TaqDNA聚合酶,因此选用的酶应在90～95(或95)℃处理后仍然具备催化活性。(4)PCR扩增目的基因时,所需原料为四种dNTP,由此可知反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的dATP。答案:(1)原核 基因组文库和cDNA文库(2)①细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列 ②甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰(3)90～95(或95)(4)dATP3.(2018·全国Ⅰ卷)回答下列问题:(1)博耶(H.Bo
7、yer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了 (答出两点即可)。 (2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的 方法导入大肠杆菌细胞;而体外重组的噬菌体DNA通常需与 组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是 。 (3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,
