枸杞多糖检测方法研究

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1、枸杞多糖检测方法研究姓名：王畅2010-8-5内容提要简介选题背景研究目的和意义研究动态与趋势拟采取的研究方法枸杞多糖简介来源：茄科植物枸杞的干燥果实枸杞多糖（Lyciumbarbarumpolysaccharide）简称LBP，是以阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖与半乳糖醛酸组成的酸性杂多糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖为主,还含有中性杂多糖和葡聚糖同多肽或蛋白质构成的复合多糖，是天然的大分子物质。ClicktoaddtextClicktoaddtextClicktoaddtextClicktoaddtextClickt

2、oaddtextClicktoaddtextClicktoaddtext白色略带棕色絮状，纤维状无味吸湿性理化性质（一）性状理化性质（二）溶解性1.溶于水，二甲基亚砜，溶解度随中性单糖含量的减少而降低2.不溶于高浓度乙醇，乙醚，丙酮，氯仿，正丁醇等有机溶剂理化性质（三）常见的化学性质测定试验结果结论硫酸—苯酚反应阳性含中性糖硫酸—半胱氨酸阳性含半乳糖醛酸卡玛斯亮蓝反应阳性含有蛋白质斐林试剂反应阴性不含还原糖碘—碘化钾反应阴性不含有淀粉选题背景（一）生理活性：增强免疫、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖血脂、保肝，可作为第三代功能性食品的功

3、能因子随着生活水平的提高，由以治病为主向防病为主的观念转变，为功能食品的开发带来了良好机遇。功效明确的枸杞多糖符合新一代功能食品的要求，枸杞多糖的研究将推动枸杞产品向更高层次发展保健食品的区分第一代保健食品：以民间的处方，秘方为基础，根据原材料的功能推断保健品的功能，未经严格的科学检测的保健食品第二代保健食品：经过动物实验和人体实验证明产品具有某项生理调节功能，其安全性，功能性都较为可靠第三代保健食品：经过进一步的严格实验及审核，除具备第二代产品的要求外，还要明确功能能因子及其结构，含量，作用机理，类似于药品的要求选题背景（二）多糖一

4、般的检测方法概括如下:1将无紫外吸收的多糖与显色剂显色，产生紫外吸收，从而用紫外法定量,如硫酸-苯酚法、硫酸-蒽酮法，3、5-二硝基水杨酸比色法测定总糖。2直接测糖法，折光法测定多糖，主要是水溶性糖。原理是用折射计测得的折射指数值(糖度)代表着溶液中可溶性物质的含量高低，若溶液中的溶质是糖物质或以糖为主的糖物质,则折射指数值就反映着糖含量的高低。3多糖检测的HPLC法也是基于上面的思路，要么衍生化后使用紫外或荧光检测器，要么使用通用型检测器，这类检测器主要有示差检测器。蒽酮-硫酸法多糖在浓硫酸作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糠醛或羟

5、甲基糠醛,而生成的糠醛或羟甲基糠醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,反应后溶液呈蓝绿色在620nm处有最大吸收，在10~100ug范围内其颜色的深浅与可溶性糖质量浓度成正比其主要反应式为选题背景（三）质量不易控制枸杞多糖是一个水溶性的大分子物质,不能如小分子物质那样,通过熔点测定、元素分析,四大光谱等鉴定后,制定质量标准。分子量测定决定了枸杞多糖的生物活性，分子量过大不易透过细胞膜，影响活性，分子量小一般是没有活性的，因此分子量数据可以作为枸杞多糖质量标准的重要指标。多糖的单糖组成分析是进行多糖质量控制和获取多糖基本信息的重要环节。单

6、糖组分及其摩尔比可以作为质量标准的重要指标。分子量测定高分子物质的分子量测定有渗透压法、蒸气压法,凝胶色谱法、超速离心法等，但已有的报导大多集中在有机溶剂体系的高分子聚合物如各种塑料产品、人工橡胶等，水体系大分子物质如蛋白质、多糖的分子量测定很少报导单糖组成测定方法主要有TLC、GC、HPLC、CE等,但是关于枸杞多糖柱前衍生化高效液相色谱法测单糖组成还未见报道。研究目的建立一个枸杞多糖的质量标准—定量鉴别方法：(1)通过HPLC法测定枸杞多糖的分子量(2)通过柱前衍生化高效液相色谱法测定枸杞多糖的单糖组成及其摩尔比在多糖的分子量测定

7、方法、尤其是枸杞多糖的测定方法尚未确立标准，无据可依的情况下，继承传统保健理论的同时结合现代科学检测技术，找出枸杞多糖的最优检测方法，制订枸杞多糖的检测标准，为以后的枸杞多糖检测提炼提供依据。研究意义研究动态常见的检测方法化学方法物理方法苯酚-硫酸法，高碘酸氧化，Smith降解，甲基化分析比旋光仪、紫外分光光度计、红外光谱仪、液相色谱仪、气相色谱仪、质谱、核磁共振从所得到的数据来看，国内对枸杞多糖的分离纯化，含量测定分离提取、分级纯化组分鉴定及其分子量、结构、基本性质等方面有大量成果报道,但研究者所得出的枸杞多糖分子量、组成、结构、等

8、研究结果各不相同枸杞多糖相对分子量的检测方法蒸汽压法凝胶过滤法HPLC渗透压法光散射法粘度法afebcd分子量的测定方法凝胶过滤法将已知分子量的葡聚糖标准品进行凝胶层系，洗脱收集，用硫酸-蒽酮法检测多糖，分别求得相应的洗