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《公共场所内公用毛巾细菌总数、大肠杆菌的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、公共场所内公用毛巾细菌总数的测定一．方法：涂抹法1.仪器1)高压蒸汽灭菌器。2)干热灭菌箱。3)培养箱:36C士1,C,4)冰箱。5)电炉。6)天平。7)灭菌平皿:直径9cm.8)灭菌刻度吸管:1mL,10raL,9)灭菌棉拭子。10)灭菌剪刀。11)放大镜。12)PH计或精密PH试纸。2培养基和试剂（1）生理盐水成分:氯化钠8.5g；燕馏水1000mL制法:将氯化钠(8.5g)溶解于蒸馏水(1000mL)中，分装到试管内，每管10mL,121℃20min；高压灭菌。（2）营养琼脂3检验程序4操作步骤4-1采样方法4.1.1随机抽取清
2、洗消毒后准备使用的毛巾4.1.2用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾对折后两面的中央各25cm2(5cm×5cm)面积范围内有顺序地来回涂抹，用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放人10mL生理盐水内，4h内送检。4.2检验方法4.2-1将放有棉拭子的试管充分振播。此液为1:10稀释液。4.2.2以无菌操作，吸取2mL检样，分别注入到两块灭菌平皿内，每皿1mL。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1mL加到9mL灭菌生理盐水中，混匀，此液为1：1OO稀释液。每个稀释度做两块平皿。4.2.3将已融化冷至45℃左右的营养琼脂培养基倾人
3、平皿，每皿约15mL，并立即旋摇平皿。冷凝后放36℃土1℃培养箱培养48h。5菌落计数方法作平皿菌落计数时，可用肉眼直接观察，必要时用放大镜检查以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落，该平皿不宜计数；若片状菌不到平皿中的一半，而其余一半中菌落分布均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，所得结果代表全皿菌落数。公用毛巾、床上卧具细菌总数按公式(1)计算：m=k*n/2m---细菌总数，cfu/25cm^2k—稀释倍数n—平均菌落数6菌落数报告方式1)9.1选择平均菌落数在3030
4、0之间的稀释度，乘以稀释倍数报告(见表1中例1).2)9.2若有两个稀释度，其平均菌落数均在30^300之间，则由两菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于2，应报告其平均数，若大于2，则报告其中稀释度较低的平皿菌落数(见表1中例2、例3),3)9.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘VA稀释倍数报告之(见表1中例4)04)9.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例5),5)9.5若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，其中一个稀释度平
5、均菌落数大于300，而相邻的另一个稀释度平均菌落数小于30，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)06)9.6若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每毫升小于1cfu(见表1中例7),7)9.7菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于10。时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五人法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见表1中报告方式栏)。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。例次不同稀释度的平均菌落数10-110-210-3两个稀释度菌落数之比菌
6、落总数（个/毫升）报告方式（个/毫升）11,3651642—16，40016,000或1.6×10422,760295461.637,75038,000或3.8×10432,890271602.227，10027,100或2.7×1044无法计数4,650513—51，3000510,000或5.1×105527115—270270或2.7×1026无法计数30512—30，50031,000或3.1×104公共场所内公用毛巾大肠菌群的测定一．纸片法1.仪器1)高压蒸汽灭菌器。2)干热灭菌箱。3)培养箱：36℃±1℃。4)冰箱。5)电
7、炉。6)天平。7)灭菌平皿：直径9cm。8)灭菌刻度吸管：1mL,10mL。9)灭菌棉拭子。10)灭菌剪刀。11)PH计或精密PH试纸。2.培养基和试剂1.乳糖胆盐发酵培养液1.1成分：蛋白胨20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000ml1.2制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中，调pH值至7.4，加溴甲酚紫溶液，混匀，分装到带有倒管的试管中，每管10ml，在115℃高压灭菌15分钟。（注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍）2伊红美兰琼脂2.1成分：蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢
8、二钾2g琼脂17g2.0%伊红水溶液20ml0.65%美蓝溶液10ml蒸馏水1000ml2.2制法：将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，调pH值至7.1，分装到烧瓶内。121℃高压灭菌15分钟备用，临用时加入乳糖并加热
