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时间:2019-07-06
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1、昆虫病原真菌一、概述二、白僵菌三、白僵菌的生殖(一)无性生殖(二)准性生殖四、白僵菌的入侵和致病机理五、白僵菌的致病性和毒力六、白僵菌的生产(一)固体发酵培养法(二)简易生产法(三)产品质量检测七、菌种的分离、复壮和纯化八、白僵菌杀虫剂的应用一、概述真菌(fungi)是最早被发现引起昆虫疾病的微生物,原因是它们生长在宿主的表面,明显可见。真菌也是首先被研究制成杀虫剂的微生物,并以其特殊的营养方式、独特的入侵方式和可靠的宿存机制在害虫的综合治理中表现出强大的生命力。真菌是微生物的一个重要类群,约有10万余种。杀虫真菌目前
2、世界上已记载的约有100属,800多种,并且数量还在不断地增加,杀虫真菌大部分是兼性或专性病原体,它们的生长和繁殖在很大程度上受外界条件限制。近20年来,真菌的生理学和生态学方面的研究取得了新的进展,使得杀虫真菌防治害虫的效果显著提高,成为微生物杀虫剂的重要组成部分。杀虫真菌具有一般真菌的共同特征,由单细胞或者多细胞组成,缺少光合作用所必需的叶绿素,其营养方式是依靠分解有机物而吸收有机物供给的能量和营养物质。真菌具有细胞壁,是真核生物(eucaryote),除少数真菌存在的游动孢子可以运动之外,是典型的不运动生物。大多数杀虫真菌由分枝状菌丝(
3、hypha)组成,菌丝由发芽的孢子(spore)发育而来,许多菌丝在一起组成菌丝体(mycelium)。真菌主要依靠孢子繁殖,孢子既有可能是无性孢子,又有可能是有性孢子。二、白僵菌被白僵菌寄生的昆虫,虫体坚硬,体表长有白色菌丝层,通常称为“白僵病”或“硬化病”,白僵菌的杀虫范围达700多种。白僵菌的菌丝呈白色、淡黄色,偶尔呈淡肉色,疏松,绒毛状,菌丝长且较细,直径为1.5μm-2μm。分生孢子梗单生或合轴分枝,再育产孢。产孢细胞常着生于短的柄细胞(stalkcell)上,通常呈球形、柱形、瓶形、直或弯,末端变细,抽长成“之”字形。最常见的杀
4、虫白僵菌有两个种,即球孢白僵菌(Beauveriabassiana)和卵孢白僵菌(B.tenella)。这两个种的区别是:球孢白僵菌的分生孢子呈球形或近球形,大小为(2μm-3μm)×(2μm-2.5μm),柄细胞与产孢细胞成簇生长。卵孢白僵菌又名布氏白僵菌((B.brongniartii)或纤细白僵菌(B.tenella),其分生孢子98%为椭圆形,大小(2.5μm-4.5μm)×(2μm-2.5μm),如果有柄细胞则相当纤细,很少成簇生长。三、生殖1、无性生殖(asexualreproduction)白僵菌可通过分生孢子、芽生孢子、节生孢子
5、、内生孢子、厚壁孢子和菌丝体断裂等多种方式进行无性生殖。生活史的类型是多型性的,在不同的培养条件下产生不同类型的孢子。白僵菌上述六种类型无性生殖的过程是:(1)分生孢子(conidium)分生孢子梗是多核的,在顶端延伸成瓶梗时,一个细胞核拉长,进到瓶梗的顶端,此时顶端膨大成分生孢子,最后分生孢子和瓶梗连接处以缢缩的方式分离,瓶梗的内层和外层细胞壁都参与了分生孢子的形成,而分生孢子梗内的核又不断分裂,随着原生质的运动向瓶梗顶端移动。在28℃培养时,接种3.5h-4h孢子就开始萌发,8h萌发孢子逐渐增多,15h即进入萌发高峰。从分生孢子萌发,长成菌
6、丝体,再形成新一代的分生孢子,最快需23h,72h后分生孢子即大量产生。(2)芽生孢子(blastospore)白僵菌在液体发酵培养或在昆虫体腔内增殖时产生大量的芽生孢子,芽生孢子由菌丝体或萌发后以出芽的方式产生,细胞核1至多个,脱落后只要条件适宜即可萌发产生短菌丝,以芽生的方式又产生下一代芽生孢子。培养前期形成的芽生孢子圆形。在28℃的人工培养条件下,分生孢子接种后15h,芽生孢子就开始形成,30h逐渐增多,49h达最高峰。芽生孢子壁薄,生活力弱,但在昆虫体内发育时能吸收大量的水分并产生有毒的红色卵孢霉素,该毒素是昆虫致死的重要因素。(3)节
7、生孢子(knotspore)菌丝长到一定时期,横隔膜的中胶层发生自溶,一个一个细胞脱落下来,即成一个节生孢子。有的节生孢子由数个细胞构成,可以由菌丝向下逐渐形成,也可以在菌丝中间形成。(4)内生孢子(endospore)内生孢子球形或椭球形,在菌体壁内形成,随后菌丝的内外壁发生自溶,内生孢子散落出来。(5)厚壁孢子(thick-wallspore)厚壁孢子由菌丝体、芽生孢子等在营养条件不良或有杂菌污染时形成。首先,菌丝体细胞增大,贮藏的颗粒物增多,在老的壁内又增生新壁,单生或串生,间生或顶生,在条件适宜时又可萌发成菌丝。若温度等条件比较适宜,产
8、生壁孢子就少。(6)菌丝断裂菌丝断裂有两种类型:第一,菌丝体内的原生质一段一段的集中,以后从空的地方断掉;第二,在生活条件不适时,菌丝螺旋状生长,然后
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