实验动物的生理病理检测

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1、实验动物的生理病理检测第一节一般体征的检查与测量方法一、体重的测量方法动物体重借助称量仪器测量小鼠、大鼠:称重可用带游码的普通天平或电子秤称重。兔、豚鼠:可直接放在婴儿秤上称重,从婴儿秤圆形刻度盘上读取动物体重。犬:经训练后可直接放在磅秤上称重。未经驯服的犬,先将犬嘴绑好,由实验员把犬抱起站在磅秤上称重,记下读数,减去实验员体重,即为动物体重。二、体温的测定方法动物体温测定是动物实验中最常用的检测指标之一。在测定前应先固定好动物。一般测大鼠或小鼠体温时,左手带上布手套,将鼠抓起,并将鼠固定于实验者手心,同时用环指和小指把鼠尾固定;兔则可用左臂

2、夹住兔体,左手提起尾巴,犬可固定在台上,然后右手持头瑞涂上少许凡士林的肛表,由肛门插入直肠一定深度。测量时间3min。测定体温除了用肛表外,还可用半导体点温度计可立即从温度表上读取温度数。各种成年动物的正常体温动物种类体温变动范围(℃)平均体温(℃)动物种类体温变动范围(℃)平均体温(℃)猿猴38.3-38.938.6大鼠38.5-39.539.0犬38.5-39.539.0小鼠37.0-39.038.0猫38.0-39.538.7鸡41.6-41.841.7兔38.5-39.539.0鸽41.5-42.542.0豚鼠37.8-39.538.

3、6猪38.0-40.039.0三、脉搏的检查方法检查脉搏较为重要,可以根据脉搏频率和性质,判断动物心脏和血液循环状态以诊断动物的疾病及判定其预后。检查犬、猫、兔等较大动物的脉搏时,先将动物略加固定,待其安静后,用右手伸入动物股部内侧,食指和中指压于血管上左右滑动,可感觉到血管象富有弹性的橡皮管在指下滑动。按脉的大小、强弱和软硬,分别施以轻压、中压和重压,体会脉搏的性质和节律。小动物的脉搏可直接在动物左侧胸部用手触及心跳最明显处,计数一定时间,算出每分钟心跳次数。四、呼吸频率的测定方法动物呼吸频率和呼吸深度的改变是实验时常见的症状之一,对阐明药

4、物作用的机制具有重要意义。因此在实验前后必须注意检查动物的呼吸节律、频率、深度的变化。这些变化可标志出呼吸器官的功能状态。频而表浅的呼吸是肺通气量不足的症状。动物呼吸频率的测定方法十分简单:首先使动物处于相对安静状态,以肉眼观察并记录呼吸的次数,一般要求记录1min的呼吸次数。第二节血液及造血功能常用 指标的检查方法一、血液常用指标的检查(一)红细胞计数动物红细胞计数可用普通的血细胞计数器,也可用光电比浊法。方法(试管法):用血红蛋白吸管吸取静脉血20mm3,挤入盛有4mL红细胞稀释液的华氏小试管中摇匀,滴入计数池,静置3min,在高倍镜下数

5、中央大方格中的5个中方格中红细胞数量,相加,计算(5格的总和×10000即为每1/2mm3内的红细胞数)。(二)白细胞计数与红细胞计数一样,可用普通的血细胞计数器,也可用电子血细胞计数机计数。计数方法:用血红蛋白吸管吸取动物静脉血至20mm3处,立即挤入盛有0.4ml白细胞稀释液的小试管内,充分摇匀,将混悬液滴一小滴入计数池,静置3min,在低倍镜下数四角4个大方格的白细胞数,计算(4格白细胞总数×50=1mm3的白细胞总数。(三)白细胞分类计数采血推片干燥染色计数形态鉴别:(1)嗜中性粒细胞:10-12um,有嗜中性颗粒。(2)嗜酸性粒细胞

6、:略大于嗜中性粒细胞,颗粒大,位于核外,粉红色,核明显,常分两叶。(3)嗜碱性粒细胞:略大于嗜中性粒细胞,颗粒粗大压在核上,呈紫色,核不明显。(4)淋巴细胞:8-15um,一般圆的多,核偏一边,核染色质排列成斑块状,较致密。核与胞浆比例为9:1或8:2。胞浆呈浅蓝色,有时有灰青颗粒。核的形状以圆形最多。(5)单核细胞:15-20um,胞浆浅淡,核肾形多有压迹.核染色质疏松,核两端常切断胞浆。(四)血小板计数计数方法:(1)小试管内加血小板稀释液0.4mL,取动物静脉血20mm3,迅速挤于稀释液内,立即充分摇匀。(2)放置4—10min,待溶液

7、呈透明红色,说明红细胞已经充分溶解,充分摇匀,取l小滴加入计数池。(3)放置10一15min,待血小板完全下沉后,先将中央大方格移至低倍镜视野内,再转以高倍镜,数5个中方格内的血小板数。(4)血小板大小形态不一致,但均呈折光的发亮淡蓝色小点,大小约红细胞的1/7—1/2,呈不规则圆形或长圆形。在计数时必须来回扭动显微镜微调,不要遗漏计数。(5)计算:5个中方格的总和×l000=1mm3血液的血小板数。(五)血细胞比容容量及红细胞 降率(血沉)测定1.血细胞比容容量测定常用Wintrobe测定法:测定时,以EDTA二钠作为抗凝剂,5mL静脉血加

8、1滴EDTA二钠,以细而长的吸管吸取抗凝血,插入Wintrobe管底部,自上而下轻轻地把血液注入至刻度10处,不能夹有气泡,在校准过的离心机内以3000r/min的

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