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时间:2019-07-04
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1、动物生理学实验课的要求遵守学习纪律,准时上、下课。人员及分组,组长负责制.必须严肃认真地进行实验操作、观察实验结果。各组的仪器和用品,由本组使用,不得与别组调换,以免混乱。爱护公共财物,注意节约各种实验用品。实验结果存在固定的盘上,每组上课时记住带一张盘,实验结束后立即将结果拷出。切勿在电脑上设置密码,带的盘要干净,免得电脑被感染病毒。保持实验室清洁整齐,随时清除污物。实验前必须仔细预习实验指导,了解实验的目的要求、基本原理以及简要的操作步骤。实验报告动物生理学实验基本操作技术一、常用手术器械蛙类实验手术器械:哺
2、乳动物手术器械:止血钳手术刀手术剪和手术镊二、手术器械的消毒方法煮沸消毒法:水沸3~5min后,将器械放入消毒锅内,等第二次水沸后15min。高压蒸汽灭菌法:高压灭菌锅,蒸汽压15~20lb/in2,温度121.6~126.6C,30min左右。不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌。化学药品消毒法:常用消毒剂有:LJ-强化戊二醛、70%乙醇(不适于金属器械的消毒)、0.1%新洁尔灭、酶皂溶液、甲醛溶液等,金属器械应浸泡30min以上。(见下表)烧灼灭菌法,适用于金属器械三、常用实验动物青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠鱼类
3、鸟类等实验动物的抓取固定方法蟾蜍蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定,以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。在抓取是蟾蜍时,注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺,以免毒液射进眼中。实验如需长时间观察,可破坏其脑脊髓(观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓)或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。家兔抓取:实验家兔多数饲养在笼内,所以抓取较为方便,一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,让其体重重量的大部分集中在左手上,这样就避免了抓取
4、过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。1、2、3均为不正确的抓取方法(1.可损伤两肾,2.可造成皮下出血,3.可伤两耳),4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓,并用手托兔体。台式固定:做血压测量、呼吸等实验和手术时,则需将兔固定在兔台上(图11-7),四肢用粗棉绳活结绑住,拉直四肢,将绳绑在兔台四周的固定木块上,头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。几种常用生理盐溶液的配制生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含
5、有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水、任氏(Ringer)溶液、乐氏(Locke)溶液和台氏(Tyrode)溶液四种,其成分各异,如下表所示。各种生理盐溶液的用途 :生理盐水:即与血清等渗之NaCl溶液,在冷血动物应用0.6%-0.65%,在温血动物应用0.85%-0.9%。任氏溶液:用于青蛙及其他冷血动物。乐氏溶液:用于温血动物之心脏、子宫及其它离体脏器。用作灌注液者须于用前通入氧气泡15
6、分钟。低钙乐氏液(含无水氯化钙0.05g)用于离体小肠及豚鼠的离体支气管灌注。台氏溶液:用于温血动物之离体小肠。动物的麻醉在急、慢性动物实验中,手术前均应将动物麻醉,以减轻或消除动物的痛苦,保持安静状态,从而保证实验顺利进行。由于麻醉药品的作用特点不同,动物的药物耐受性有种属或个体间差异及实验内容及要求不同,因此正确选择麻醉药品的种类、用药剂量及给药途径十分重要。理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善,其毒性和对生理功能干扰最小,使用方便。1.常用麻醉剂的种类和用法局部麻醉剂:0.5%-1.0%盐酸普鲁卡因或2%盐酸
7、可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉。全身麻醉剂:发挥性的乙醚,非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等,在生理学实验中,多采用全身麻醉剂。2.麻醉前的准备工作熟悉麻醉药品的特点 根据实验内容合理选用麻醉药。麻醉前应核对药物名称;检查药品有无变质或过期失效。狗、猫等手术前应禁食12小时,以减轻呕吐反应。需在全麻下进行手术的慢性实验动物,可适当给予麻醉辅助药。例如,皮下注射吗啡镇静止痛,注射阿托品减少呼吸道分泌物的产生等。3.给药方法1)全身性麻醉:吸入麻醉:乙醚注射麻醉:常用乌拉坦、戊巴比妥钠及氯醛糖等。主要给药途径有:静
8、脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮下淋巴囊注射等2)局部麻醉:表面麻醉:药物通过点眼、喷雾或涂布作用于粘膜表面,转而透过粘膜接触粘膜下神经末梢而发挥作用。该药物除具有麻醉作用外,还有较强的穿透力,如的卡因、利多卡因;浸润麻醉:用注射的方法将药物送到神经纤维旁。此类药物只需有局部麻醉作用,不一定要求有强大的穿透力,如普鲁卡因(对氨苯甲酸酯)、可卡因、利多卡因(其效力是
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