《基因工程基本内容》PPT课件

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1、基因工程的基本内容Geneengineering实例：转基因抗虫棉抗虫棉普通棉想一想：基因工程培育抗虫棉的简要过程.基因工程培育抗虫棉的简要过程：苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因毒蛋白杀死害虫棉花细胞基因工程概念基因工程：在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因产物DNA分子水平基因工程培育优点：1、目的性强（定向改变生物性状）2

2、、育种周期短3、克服远源杂交不亲和障碍基因工程概念基因工程：在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因产物DNA分子水平(二)基因工程操作的工具1、基因的剪刀——限制性内切酶2、基因的针线——DNA连接酶3、基因的运输工具——运载体“”1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（1）来源：（2）作用：主要从_________(如

3、细菌)中分离出来（4）举例：原核生物_____和切割DNA分子内__________识别特定的核苷酸序列即:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。（3）特点：特异性判断：所有的限制性核酸内切酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列？专一性限制酶例如：大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。切割具体部位:磷酸二酯键5’5’3’3’5’3’5’3’黏性末端什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶连

4、接部位：磷酸二酯键梯子的扶手不是氢键梯子的踏板3、“分子运输车”——运载体作用一：作为运载工具，将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。作用二：利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内，对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。质粒、噬菌体和动、植物病毒3、“分子运输车”——运载体常用的运载体：质粒是一种能够自主复制___________DNA分子，在细菌中以独立于染色体之外的方式存在是一种特殊的_______。质粒存在于许多_____以及_______等生物中。最常用的质粒是________的质粒。其中常含有抗生素___________。小型双链环状遗传物质细菌酵母菌大

5、肠杆菌抗性基因大肠杆菌质粒的分子结构示意图：DNA大肠杆菌细胞质粒目的基因插入位点复制原点氨苄青霉素抗性基因“标记基因”有切割位点能复制并带着插入的目的基因一起复制有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。运载体需具备的条件:1、能够自主复制并稳定地保存。2、具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接。3、具有标记基因，便于进行筛选。4、对受体细胞无害。<三>、基因工程基本操作的四个步骤1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定1.用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。2.

6、用_____________切断目的基因，使其产生_________________。二、目的基因与运载体结合3.将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）限制酶黏性末端同一种限制酶的黏性末端切口DNA连接酶相同1）以下说法正确的是（）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来C练习2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制（）B、有多个限制酶切点C、具有标

7、记基因D、它是环状DNAD练习3）有关基因工程的叙述中，错误的是（）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A练习4）有关基因工程的叙述正确的是（）A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料D练习5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目的基因与