rc動物細胞liu'sstain

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1、實驗五、動物細胞Liu’sstain日期：2005/10/27預習：Liu’sstain染色法是一種廣泛使用於血球染色的染色方法，1953年由台大的劉禎輝醫師所改良而來，在台灣已有五十多年的使用歷史。利用Liu’sA染劑中的甲醇固定細胞，及以伊紅（酸性染劑）可以染上細胞內鹼性物質（例如血紅素）；而Liu’sB染劑中含甲基藍（鹼性染劑）可以染上細胞內酸性物質（例如核酸），因而使細胞核呈現藍色、細胞質及顆粒等則呈現粉紅色。步驟：1取800μlHelacell懸浮液滴於載玻片上乾燥（本實驗使用離心法使

2、細胞貼附在玻片上，可以減少細胞的損傷及變形）。2滴下100μlLiu’sA染劑，停留15～30秒。3滴下200μlLiu’sB染劑（染劑A體積的2倍），吹氣使A染劑與B染劑混和均勻，此時液面可以見到綠色金屬光澤，停留1.5～2分鐘。4在水龍頭下沖去玻片背面的染劑（沒有細胞面），再將水龍頭水關小，輕輕沖洗玻片正面的染劑，直到玻片上的染劑幾乎被沖洗掉（有細胞面，水不可以從細胞處直接沖下）。5風乾，以顯微鏡觀察細胞型態，照相記錄。結果：圖一、圖二、圖三為Helacell經Liu’sstain後細胞在顯

3、微鏡下（400×）鏡檢的型態及顏色。深紫色的部分為細胞核，淺紫色的部分微細胞質。討論：本次的實驗結果可以明顯看到Helacell深紫色的細胞核，還有淺紫色的細胞質。深紫色的部分為核酸，淺紫色的為細胞質。在圖中有觀察到雙核的現象。這次的染色結果雖然有成功，但是顏色有點太淺，且對比不明顯，有可能是沖水沖太久，染劑褪掉太多，所以之後在染色時可以所短褪色的時間。心得：這次的染色法算是比較簡單的染色法，但是可以染出很漂亮的細胞，照出很漂亮的圖，所以感覺很有成就感。雖然說顏色有點太淺，但是看到照片後還是很開

4、心，因為玻片要保存所以不能用油鏡油所以不能用1000倍的倍率看，看到的細胞比較小，也看不到核酸的樣子，但是之後的實驗可就可以看到了，還蠻期待的。附錄：雙核細胞核細胞質圖一.Helacell經Liu’sstain後細胞在顯微鏡下（400×）鏡檢的結果圖二.Helacell經Liu’sstain後細胞在顯微鏡下（400×）鏡檢的結果圖三.Helacell經Liu’sstain後細胞在顯微鏡下（400×）鏡檢的結果