动物细胞工程核移植

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1、专题二细胞工程细胞工程概念原理和方法、操作水平、目的、分类指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。细胞全能性1、概念2、为什么已经分化的细胞依然具有全能性？3、在生物发育过程中，为什么细胞没有表现出全能性，而是分化成各种组织和器官？4、细胞全能性大小比较细胞全能性大小比较①受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞②体细胞：植物细胞>动物细胞③分化程度低的细胞>分化程度高的细胞④分裂能力强的细胞>分裂能力弱的细胞⑤随着细

2、胞分化的程度不断提高，细胞的全能性逐渐减小。即时应用有关细胞全能性的叙述，不正确的是（）A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此其全能性最高B.生物体内细胞由于进行分化，全能性不能表达C.卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高D.在一定条件下，植物细胞离体培养能表现出全能性C动物细胞工程1、常用技术手段2、基础技术3、应用动物细胞工程通常采用的技术手段动物细胞融合单克隆抗体动物细胞核移植是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？

3、取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。一、动物细胞培养的概念就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？原理：细胞增殖（有丝分裂）二、动物细胞培养的操作过程思考1、选取什么样的组织材料？动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织2、为什么选用上述组织材料？增殖能力强，分化程度低，更容易培养思考3、为什么将组织材料分散成单个细胞？4、如何将组织分散成单个细胞？剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明？说明细胞与细胞间的主要物质是蛋

4、白质胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。5、动物细胞培养中的两个显著特点：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。细胞贴壁过程细胞的接触抑制接触抑制单层细胞思考6、什么是原代培养？什么是传代培养？原代培养与传代培养的分界点？分瓶的继续培养胰蛋白酶使用几次？两次7、传代培养的三个阶段①、10代以内：容易传

5、代，传代细胞正常的二倍体核型不会改变。核型（染色体组型）：一个细胞内所有染色体的大小、形状和数量特性的汇总。②、10-50代左右时：细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。③、50代之后：如果继续传代培养，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。遗传物质改变——细胞系接触抑制50代以后失去接触抑制细胞膜表面糖蛋白减少，细胞黏着性降低。8、人们一般保存的是哪类细胞？为什么？思考9、动物细胞培养的结果？获得细胞群是否体现出细胞的全能性？没有二、动物细胞培养的操作过程分离组织（幼龄动物）分散

6、细胞（胰蛋白酶）原代培养（细胞增殖）传代培养（细胞增殖）分装（胰蛋白酶）三、动物细胞培养条件能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？1、无菌、无毒的环境对培养液和培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的抗生素;定期更换培养液；2、营养葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等动物血清、血浆3、温度和pH温度36.5±0.5度，pH7.2～7.44、气体环境培养皿或松盖培养瓶，O2和CO2（95%空气和5%CO2）O2是细胞代谢所必需的。CO2维持培养液的pH。合成培养基、液体培养；回顾1、动物细胞培养概念、原理2、动物细胞培养过程细胞贴壁、细胞接触抑制、原代培养、传代培养3、动物

7、细胞培养条件四、动物细胞培养技术的应用1、生产生物制品病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；3、用于检测有毒物质及毒性；2、动物基因工程离不开动物细胞的培养；4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。阅读P46-47总结动物细胞培养与植物组织培养的比较学习指导第31页资料：为什么体外培养的动物细胞会贴壁？贴附是有机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式，包括细胞与细胞之间的相互接触和细胞与细胞外基质之间的相互接触两种方式。正是基于细胞的这种贴附生长的特征，使得不同细胞之间结合而形成组织，也