肿瘤细胞原代培养与保存_刘小珍

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1、肿瘤细胞原代培养与保存11，21，2刘小珍，郑智国，凌志强（1.浙江省肿瘤医院，浙江杭州310002；2.浙江省肿瘤研究所，浙江杭州310002）摘要：肿瘤细胞原代培养技术可为日益深入的肿瘤研究及治疗提供充足有效的细胞来源，是癌症在体外研究的重要手段，与体内研究相辅相成。但目前肿瘤细胞原代培养成功率不高，许多问题还需继续探讨与研究。全文综述目前国内外肿瘤原代培养方法、条件及冻存注意事项，包括：肿瘤组织类型与处理、细胞培养及纯化方法、原代肿瘤细胞生物特性检测、肿瘤细胞冻存条件等，综合探讨各方法的优缺点。比较获

2、得更有效的肿瘤细胞原代培养方法，将其运用于探索肿瘤发生机制、肿瘤细胞治疗及药敏试验，推进肿瘤治疗的进程。关键词：肿瘤细胞原代培养；细胞纯化；细胞冻存中图分类号：R197文献标识码：B文章编号：1004-0242（2015）04-0276-08doi：10.11735/j.issn.1004-0242.2015.04.A006PrimaryCultureandPreservationofTumorCells11，21，2LIUXiao-zhen，ZHENGZhi-guo，LINGZhi-qiang（1.Zhe

3、jiangCancerHospital，Hangzhou310002，China；2.ZhejiangCancerResearchInstitute，Hangzhou310002，China）Abstract：Primaryculturetechniquescanprovideadequateandeffectivesourceoftumorcellsforthecancerdeepeningresearchandtreatment，whichisanimportantmethodologyforvitro

4、cancerresearch.Furthermore，itisthesupplementarytovivostudies.Butthesuccessrateoftumorcellsinprimarycultureisnothigh，andmanyquestionsneedtobefigureoutwithsustainedexploration.Thispaperreviewsthecurrenttumorprimaryculturemethods，conditionsandfrozenprecaution

5、s，including1)tumortissuetypeandtreatment，2)methodologyofprimarycultureandpurification，3)detectingthebiologicalcharacteristicsofprimarytumorcells，4)freezingconditions.Thepaperwillgiveacomprehensivediscussionofvariousadvantagesanddisadvantagesofthemethodabov

6、e-mentioned.Itisconducivetoobtainmoreeffectiveprimaryculturemethodstoexplorethetumormechanism，tumortherapyanddrugsusceptibilitytesting，whichwillpromotetheprocessoftumortherapy，andbringthegospeltocancerpatients.Keywords：tumorcellsinprimaryculture；cellpurifi

7、cation；cryopreservation原代培养也叫初代培养，是从供体取得组织后研究与治疗起着举足轻重的作用。然而肿瘤原代培在体外进行的首次培养，已经广泛应用于各类实验养细胞成活率低、实验条件要求高及杂细胞污染等，［1，2］［4~6］研究中。原代培养的肿瘤细胞因为组织刚刚离未能被广泛应用，限制了肿瘤研究进行。本文综体，其生物学特性未发生很大变化，仍保留原二倍体合国内外针对肿瘤组织原代培养过程、方法及相关遗传性，基因保留量在90%以上，适用于药物敏感培养条件进行比较分析，寻求探讨有效的肿瘤原代［3］性试

8、验及机制探究相关试验，其数据更具有说服力。培养方法，以期为肿瘤研究及临床治疗做准备工作。同时通过原代培养技术建立相应肿瘤细胞系或株，研究其癌变、分子遗传以及转移演变机制等，对肿瘤1肿瘤组织收稿日期：2014-12-25；修回日期：2015-02-02基金项目：卫生事业专项补助资金“浙江省组织生物样本库创新服务质量优良的肿瘤组织是原代细胞培养成功的首平台建设补助”（2100208）通讯作者：凌志强，E-mail：l