仪器分析大连理工大学42高效液相色谱仪

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1、第四章 高效液相色谱法和超临界流体色谱法4.2.1高效液相色谱仪与结构流程4.2.2主要部件4.2.3检测器第二节 高效液相色谱仪instrumentofHPLCHighperformanceliquidchromatographyandSupercriticalfluidchromatography2021/7/144.2.1液相色谱仪与结构流程2021/7/14液相色谱仪(2)2021/7/14液相色谱仪(3)2021/7/14液相色谱仪(4)2021/7/14液相色谱仪(5)2021/7/14液相色谱仪(6)2021/7/141.结构流程2021/7/142021/7/14

2、4.2.2主要部件(1)高压输液泵主要部件之一,压力:150×105~350×105Pa。为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10μm),液体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳,脉冲小,流量稳定可调,耐腐蚀等特性。(动画)2021/7/14(2)梯度淋洗装置外梯度(高压梯度):利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。内梯度(低压梯度):一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。2021/7/14(3)进样装置流路中为高压力工作状态,

3、通常使用耐高压的六通阀进样装置,结构如图所示:2021/7/14(4)高效分离柱柱体为直形不锈钢管,内径1~6mm,柱长5~40cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。2021/7/14(5)检测器紫外检测器示差折光检测器 荧光检测器光电二极管阵列检测器2021/7/144.2.3检测器a.紫外检测器应用最广,对大部分有机化合物有响应。特点:灵敏度高;线性范围宽;流通池可做得很小(1mm×10mm,容积8μL);对流动相的流速和温度变化不敏感;波长可选,易于操作;可用于梯度洗脱。2021/7/14b.光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展;光电二极管阵列检测器:1024个

4、二极管阵列,各检测特定波长,计算机快速处理,三维立体谱图。2021/7/142021/7/14光电二极管阵列检测器2021/7/14三维:光谱-色谱图2021/7/14c.示差折光检测器(Differentialrefractiveindexdetector)除紫外检测器之外应用最多的检测器。可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度成正比。通用型检测器(每种物质具有不同的折光指数)。灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。偏转式、反射式和干涉型三种。2021/7/14示差折光检测器2021/7/14d.荧光检测器(Fluorescencedetector)高

5、灵敏度,高选择性。对多环芳烃,维生素B,黄曲霉素,卟啉类化合物,农药,药物,氨基酸,甾类化合物等有响应。2021/7/14请选择内容结束4.1高效液相色谱法的特性4.2高效液相色谱仪4.3液相色谱的固定相与流动相4.4液相色谱中的主要分离类型4.5液相色谱分析条件的选择4.6高效液相色谱法的应用4.7离子色谱法4.8超临界流体色谱法2021/7/14

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