临床微生物学尿培养操作规范

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1、临床微生物学尿培养操作规范中华医学会检验医学分会临床微生物学尿培养操作规范尿路感染尿液标本采集和运送标本验收实验室检查结果观察和报告尿路感染概念:综合症分类:上尿路感染(如肾盂肾炎)下尿路感染(如膀胱炎)男性还可出现前列腺感染,不同部位同时感染也很常见感染人群:各个年龄段,好发于女性,男:女之比为1:10。尿路感染症状:发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛,临床表现可因患者的年龄和健康状况不同而异。诊断方法:细菌学检查,主要致病菌可因尿路感染的原因不同而有所不同(表1)表1尿路感染的原因及常见病原菌感染原因主要致病菌感染特点上行感染泌尿系统解剖结构和生理功能改变引起

2、的感染血行感染直接感染大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、淋病奈瑟菌大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、肠杆菌、普罗威登菌、沙雷菌、不动杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、肠球菌葡萄球菌、结核分枝杆菌、沙门菌大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、肠杆菌主要为肠道菌群或会阴部细菌逆行感染,多见于女性,多为单一细菌感染,以大肠埃希菌感染最常见多见于留置导尿管、肾盂造瘘术、尿路结石、尿路重建、前列腺肥大、膀胱排空能力受损的患者,容易发生多种微生物的混合感染,易被误认为标本污染发生于菌血症的患者,血液中的细菌通过血流进入肾脏引起感染,比较少见外伤或肾周围器官发生感染时,细菌直接侵入肾脏引起感染,非常少见一、

3、尿液标本采集和运送1.采集指征:(1)有典型的尿路感染症状;(2)肉眼脓尿或血尿;(3)尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性;(4)不明原因的发热,无其他局部症状;(5)留置导尿管的患者出现发热;(6)膀胱排空功能受损;(7)泌尿系统疾病手术前。一、尿液标本采集和运送2.采集方法:未使用抗生素之前,注意避免污染(1)清洁中段尿:晨尿最好,睡前少饮水,起床后用肥皂水清洗会阴部,女性应用手分开大阴唇,男性应翻上包皮,仔细清洗,再用清水冲洗尿道口周围;开始排尿,将前段尿排去,中段尿约10~20ml直接排入专用的无菌容器中,立即送检,2h内接种。简单、易行,最常用很容易污染,应嘱咐

4、患者正确留取。一、尿液标本采集和运送2.采集方法:(2)耻骨上膀胱穿刺:使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液是评估膀胱内细菌感染的“金标准”有一定的痛苦,患者难以接受主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集一、尿液标本采集和运送2.采集方法:(3)直接导尿:按常规方法对会阴局部进行消毒后,用导尿管直接经尿道插入膀胱,获取膀胱尿液可减少尿液标本污染,准确反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道细菌引入膀胱,导致继发感染不提倡使用一、尿液标本采集和运送2.采集方法:(4)小儿收集包:无自控能力的小儿很难避免会阴部菌群污染产生假阳性所以只有在检验结果为阴性时才

5、有意义。如果检验结果为阳性,应结合临床进行分析必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。一、尿液标本采集和运送2.采集方法:(5)留置导尿管:先消毒导尿管外部,按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液防止混入消毒剂注意不能从尿液收集袋中采集尿液。一、尿液标本采集和运送3.采集容器:(1)应由惰性材料制成;(2)洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏;(3)不含防腐剂和抑菌剂;(4)广口、具有较宽的底部、容积应>50ml(5)盒盖易于开启。一、尿液标本采集和运送4.标本运送:及时送检、及时接种,室温下保存时间不得超过2h(夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存),4℃冷藏保存时间

6、不得超过8h,但应注意冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。二、标本验收1.申请单验收:要求除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等,申请单是否填写完整。2.标本验收:(1)标本标识是否与申请单相符;(2)标本容器有无溢漏、渗出,是否加盖;(3)送检时间是否超过规定的标本保存时间。二、标本验收3.不合格标本处理:(1)对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系;(2)对标识不符、送检容器不合格、送检时间超过规定时间的标本应注明原因,退回,要求重新留取标本,并做记录。三、实验室检查1.直接涂片检查:无需常规进行涂片检查。对于临床怀疑淋病奈瑟菌、假

7、丝酵母菌或结核分枝杆菌感染的标本:可用无菌吸管吸取尿液5~10ml置无菌试管中,3000~4000r/min离心30min,倾去上清液,取沉渣涂片,行革兰染色或抗酸染色后镜检。三、实验室检查2.细菌培养:(1)普通培养:将收集标本的容器轻轻旋转混匀,用定量接种环分别取尿液1μl涂抹接种血平板和麦康凯平板(或中国蓝平板),35~37℃培养18~24h,观察结果。对导尿、耻骨上膀胱穿刺和已使用抗生素治疗的患者标本应增加一个10μl接种量。(2)特殊培养:对怀疑有苛养菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺法或导尿法采集样本,加种一

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