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时间:2019-06-27
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1、1898高尔基(Golgi)-银染神经细胞----高尔基体---高尔基复合体一.高尔基复合体的形态结构相对恒定连续的整体膜结构电镜扁平囊泡(cisternae)小囊泡(vesicles)大囊泡(vacuoles)形成面高尔基复合体各部分膜囊具有不同的细胞化学反应,可用来进行鉴别光镜:网状结构呈极性的细胞器烟草根尖细胞高尔基体的电镜照片顺面网状结构(cisGolginetwork)[CGN]扁囊弯曲成凸面又称形成面(formingface)或顺面(cisface)特征:位于顺面最外侧的扁平膜囊。中间多孔呈连续分枝状。可被锇酸特异性染色。嗜锇反应,经锇酸浸染后,高尔基体的顺面膜囊被特异地染
2、色;功能:接受内质网新合成的蛋白质与脂类,将其分类后大部分转入中间膜囊,小部分再返回内质网。中间膜囊特征:位于顺面网状结构与反面网状结构之间由扁平囊与管道组成。标志酶:NADP酶烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的细胞化学反应,是高尔基体中间几层扁平囊的标志反应.功能:糖基修饰糖酯形成多糖的合成反面网状结构(transGolginetwork)[TGN]面向质膜的凹面又称成熟面(matureface)或反面特征:位于反面的最外层。形态为管网状,与反面囊泡相连,另一侧深入细胞质中。标志酶:TPP酶,CMP酶焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的细胞化学反应,可特异地显示高尔基体的反面1-2层膜
3、囊;胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)的细胞化学反应,可显示靠近反面上的一些膜囊状和管状结构,CMP酶也是溶酶体的标志酶,溶酶体是在此产生的。功能:参与蛋白的分类与包装,运输。周围小泡顺面侧的囊泡,小囊泡[vesicles]:内质网与高尔基体间的运输小泡。反面侧的囊泡,大囊泡[vacuoles]:体积较大,运输作用分泌泡与分泌颗粒。扁平囊呈盘状,3-10层称-----高尔基堆扁平囊间距:20-30nm;囊腔宽:6-15nm形成面膜薄:6nm;成熟面膜厚:8nm囊腔内含:中等电子密度的物质中间膜囊作用:多数糖基修饰;糖脂的形成;来源:小囊泡融合。凸面:形成(顺)面;小囊泡Φ30-80nm球形小
4、泡,膜厚:6nm;泡内含物质:低电子密度物质,较透明。来源:由rER‘芽生’而来。大囊泡Φ100-150nm;膜厚:8nm;泡内含物质:高电子密度物质,浓缩泡。来源:扁平囊周边或局部球状膨突脱落形成。凹面:成熟(反)面二.高尔基复合体的分布和数量根据细胞类型不同,分布状态有所不同:神经细胞---核周围交织成网;肝细胞---分散分布;有极性的上皮细胞---核顶部,顺面朝向内质网,反面朝向质膜。根据分化程度和功能状况,其发达程度和数量不同:分化程度、分泌功能↑→数量↑(多达数千)(胰腺外分泌细胞、浆细胞)未分化的胚胎细胞、分泌功能不旺盛的肌细胞和淋巴细胞→数量↓三.高尔基复合体的化学组成高
5、尔基复合体膜,内质网膜,细胞膜化学组分上的对比粗面内质网膜高尔基复合体膜细胞膜总磷脂61%45%40%卵磷脂47.8%31.4%32.0%胆固醇0.120.470.51含有多种酶:特征酶:糖基转移酶从形成面到成熟面多糖的含量呈梯度上升趋势四.高尔基复合体的功能高尔基复合体与细胞的分泌活动参与糖蛋白的合成和修饰参与蛋白质的改造对蛋白质的分拣运输高尔基复合体与溶酶体的形成高尔基复合体与膜的转变。(一)高尔基复合体与细胞的分泌活动•3H标记亮氨酸加入培养基内,在不同的时间内收集细胞做放射性自显影.3分钟20分钟90分钟高尔基复合体参与了细胞分泌活动,并起着重要的运输作用;在分泌颗粒的形成过程
6、中起着浓缩、修饰、加工等作用。分泌蛋白质的分泌途径蛋白质在rER的核糖体上合成进入内质网腔(修饰)细胞内膜泡运输高尔基复合体(加工修饰)浓缩泡酶原颗粒分泌泡细胞内贮存分泌物排向胞外分泌过程概括为六个阶段:1核糖体阶段-------肽链的合成;2内质网腔阶段-----肽链延伸、加糖、折叠与储存;3胞内运输阶段-----分泌蛋白转运,以出芽方式形成运输小泡,移向高尔基体并与扁囊融合;4分泌蛋白浓缩阶段---由形成面向分泌面移动,完成浓缩、加工,形成浓缩泡脱离进入胞质中;5胞内储存阶段-----继续浓缩,等待释放;6胞吐阶段---------浓缩泡向细胞顶端移动,最后与质膜融合,排到胞外。(
7、二)高尔基复合体对蛋白质的修饰加工1.参与糖蛋白的合成和修饰N-连接的寡糖链:在rER腔内合成。(半成品)糖蛋白:3H标记甘露糖短期培养颗粒主要在rER3H标记半乳糖;唾液酸只在高尔基体3H标记N-乙酰葡萄糖胺同时在rER和高尔基体表明N-乙酰葡萄糖胺和甘露糖存在于寡糖链的核心部位,是在rER膜上的糖基转移酶的催化下加在肽链上的;而半乳糖、唾液酸是构成糖链的周围部分,在高尔基体内。正在ER中合成蛋白质的N-连接糖基化N-连接的寡聚糖的进一步加工
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