《醋酸纤维膜电泳》PPT课件

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1、醋酸纤维薄膜电泳实验操作指南北京君意东方电泳设备有限公司BeijingJUNYI-DONGFANGElectrophoresisEquipmentCO.,LTDhttp://www.bj-ok.com网址实名：君意东方TMJUNYI……点击进入〉〉〉退出请按ESC企业资质CredentialsISO9001:2000国际质量管理体系认证《北京高新技术企业》《制造计量器具许可证》《医疗器械生产企业许可证》《医疗器械产品注册证》《质量、信誉双保障师范单位》凭借国内一流和领先的技术与雄厚的实力，敢于在国内率先提出“电泳仪保修三年”的服务承诺。电泳仪以极其优异稳定的性能赢得很多客户的高度

2、好评，凭借电泳仪的高度稳定性才能确保“君意”电泳槽每一次实验都能获得精确而清晰的电泳实验效果。凭借国内一流和领先的技术与雄厚的实力，敢于在国内率先提出“免费试用，满意后购买”的为新顾客解除购买顾虑保障消费者利益“的服务措施。经试用后，越来越多的老师，科研人员对“君意东方”的电泳产品和实验效果给予极高的评价。试用满意度和留用率为100%。实验结果的准确性和精度质量为100%。一次做成实验的成功率为100%，居国内电泳产品领先水平。北京君意东方电泳设备有限公司生产的电泳产品，已多次代表中国出口到美国、巴西、澳大利亚等国家，国外的客户对国内的各个不同厂家的产品进行检测、试用后，并给

3、予“君意东方”的电泳产品最好的评价，最终选定并批量定货的是“君意东方”的电泳产品。产品质量JY-SP7型醋酸纤维膜电泳槽(780元）双桥结构，配置三根铂金丝，有循环冷却用规格尺寸：2×250×50(mm)可做各种纸电泳、醋酸纤维膜、载玻片等电泳适用于临床检验、高校教学、科研等领域材料和试剂染色液：丽春红S（猩红）：1.6g三氯醋酸：12.0g蒸馏水：200ml漂洗液：(分三盒装)95%乙醇：450ml冰醋酸：50ml蒸馏水：500ml镊子两把方饭盒一个长饭盒四个铅笔、直尺、剪刀、纱布蒸馏水摇床（可选）搅棒或磁力搅拌器锥形瓶或烧杯量筒（1000、250和100ml）玻璃片（1厘米宽、

4、1毫米厚）微量移液器吸水纸封口膜醋酸纤维膜的取用（1）1用干净镊子从封口袋中夹出醋酸纤维硬膜，待硬膜露出2/3时进入下一步。醋酸纤维膜的取用（2）2镊子转为夹取膜的短边，将膜取出。转入下一步。醋酸纤维膜的浸润（1）3将膜的光面向下，使膜浮在缓冲液面上。注意：不要将膜直接插入缓冲液面下。醋酸纤维膜的浸润（2）4缓冲液就会自膜的边缘逐渐渗透。醋酸纤维膜的浸润（3）5直至膜全部均匀润湿。醋酸纤维膜的裁剪（1）6用干净镊子取出全部均匀润湿的膜，用干净剪刀在暗面的“左上方”剪角。（这样便于在后续的操作中确定膜的反正面。）醋酸纤维膜的裁剪（2）7如果只做一个样品，可以从膜上剪取一条。醋酸纤维膜

5、的加样（1）8用吸水纸吸干膜表面的缓冲液。（加样处若不吸干的话，样品会随膜表面的缓冲液不定向漂移，造成实验结果不理想）醋酸纤维膜的加样（2）9吸干表面的缓冲液时，若发现膜内出现干燥时（部分区域变白），应将膜放回缓冲液中润湿均匀后再吸干表面的缓冲液。醋酸纤维膜的加样（3）10用铅笔在暗面距离上方1cm左右轻轻划线，根据上样量决定划线长度。（一般是1.5cm，宽度不超过4mm）醋酸纤维膜的加样（4）11将样品用微量移液器点在封口膜或塑料膜的表面形成液滴。醋酸纤维膜的加样（5）12用宽度为1cm、厚度为1-1.5mm，具有一定长度的玻璃片作为点样工具，用其平整的边缘蘸取样品。醋酸纤维膜的

6、加样（6）一手用干净镊子按住膜片，另一只手拿着蘸取样品的玻璃片“印盖”在加样线上。13醋酸纤维膜的加样（7）可以调节膜片的角度使样品均匀分布于样品线内。14醋酸纤维膜的电泳（1）将加好样的膜片架在电泳槽的调节杆上，加样端靠近负极。15醋酸纤维膜的电泳（2）在膜片的两端加盖双层纱布，去除纱布间的气泡，使正、负极缓冲液可通过膜片得以连接。16醋酸纤维膜的电泳（3）以恒定电流进行电泳。中压电泳仪电流大小按所有膜的宽度之和进行计算：常用0.5毫安/厘米。17醋酸纤维膜的电泳（4）左图是一张9(1.5×6)厘米宽的膜被分成6条膜片。所以恒定电流应设为：5mA或4mA(90.5=4.5mA)

7、18膜宽1.5cm醋酸纤维膜的电泳（5）样品中加入0.05%(g/ml)溴酚蓝，便于在电泳过程中判断样品泳动状况。19醋酸纤维膜的染色、脱色20（染色、脱色时均可用摇床，用我厂的JY15B型时可选最大频率。）电泳完毕，将纤维膜浸入染色液中3分钟。然后放入第一盒漂洗液中5分钟再移至第二、第三盒漂洗液中。直至蛋白呈红色，背景无色为止。醋酸纤维膜电泳结果21稀释5倍的小牛血清恒定电流5mA电泳半小时染色、脱色的结果。故障分析（1）在浸泡膜的时候由于缓冲液直接到达了暗面的内部