《酵母菌的培养上》PPT课件

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时间:2019-06-26

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1、探究培养液中酵母菌种群数量的变化试管编号培养液(葡萄糖)/mL酵母菌母液/mL温度(℃)A100.128B10—28设置两(多)组样品(重复实验,减少误差),每组两个试管(实验组A和空白对照组B)血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网放大后的方格网每块计数板由H形凹槽分为2个同样的方格网。方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,因此计数室体积为0.4

2、mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.另一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内怎样进行酵母菌的计数?对试管培养液中酵母菌逐个计数非常困难,可用抽样检测法:将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸

3、去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌平均数量,再以此为根据,估算大方格中的酵母菌总数。盖玻片下,培养液厚度为0.1mm,大方格面积是4mm2,共0.4mm3。可算出1ml培养液中酵母菌总数的公式:2500x(x为大方格内酵母菌数),再计算试管中10毫升培养液中酵母菌总量。(P73)取样法计算小方格中酵母菌数量25个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格*********抽样检测:5×16=80个小格抽样检测:4×25=100个小格注意事项:进行计

4、数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液稀释一定倍数后再计数。显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取相邻两边及顶角计数。例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.4mm3,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。例2:在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时

5、,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌数为1600,据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1085×107稀释例3检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻个/mL。5n×105

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