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时间:2019-06-26
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1、[根据各地教学实际选用]15.DNA粗提取的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。16.PCR技术的原理是DNA复制,需要的条件是引物、模板、原料、耐高温的DNA聚合酶等,过程是变性、复性和延伸。17.蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定。18.植物有效成分的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。专题九抓住基础研考向战考场[高考方向要明了]1对微生物利用的,考查内容多集中在微生物的分离、培养和数量测定,微生物发酵生产特定产物,如2011新课标全国卷T39,2010山
2、东卷T34。2酶的应用、制备和应用固定化酶是要重点掌握的内容。如2011江苏卷T15,2010江苏卷T25。3生物技术在食品加工及其他方面的应用,高考对其中植物组织培养技术的涉及较多,要多加注意。如2011江苏卷T3,2010北京卷T1。1.消毒和灭菌的比较使用方法产生的结果常用方法消毒较温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部部分对人体有害的微生物煮沸消毒、化学药剂消毒灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物(含芽孢和孢子)灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2.特定微生物数量的测定(1)测定微生物数量的方法。①直接计数法:常用的是显微镜直接计数法。②间接
3、计数法:常用的是稀释平板计数法。(2)测定微生物数量方法的实际应用。①土壤中好氧型细菌的计数:a.制备土壤稀释液:取土壤表层3~5cm处的土样;制备系列稀释液。b.取样及倒平板:该实验的接种方法是稀释涂布平板法。c.培养。d.观察记录结果:每克土壤样品菌数=某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数/涂布平板时所用稀释液的体积。②检测天然水源中细菌总数和大肠杆菌菌落数:细菌总数通常是指1g或1mL检测样品中所含细菌菌落的总数。大肠杆菌菌落数通常是指每100g或100mL检测样品中所含细菌的实际数值。③检测某种食品中的细菌总数和大肠杆菌菌落数:一般来说,大肠杆菌菌落
4、总数越多,说明食品的卫生质量越差。④土壤中分解尿素细菌的计数:某些细菌中含有尿素分解酶,能将培养基中的尿素分解成氨,该物质的水溶液会使酚酞指示剂呈现红色。(3)制备系列稀释液的方法。将1g土样放入99mL无菌水中,制成102倍的稀释液,用1mL无菌移液管吸取上述浓度的溶液0.5mL,移入装有4.5mL无菌水的试管中,即配制成103倍的稀释液,用同样的方法可以配制成104、105、106倍的稀释液。将待测样品进行稀释的目的是使微生物细胞分散开,使实验结果更接近真实值。3.培养基对微生物的选择分析(1)分离微生物的方法:从混合样品中获得某种微生物的方法通常有
5、两种:①利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物质,从而使它成为一种加富培养基。②利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物,经培养后,原来占优势的微生物生长受抑制,而分离对象却可乘机大大增殖,在数量上占优势。(2)选择培养基及应用实例:①选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进需要的微生物的生长,目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。②选择培养基应用实例:a.培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。b.培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。c.培养基中缺乏氮
6、源时,可以分离固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。d.当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。e.改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。4.菌株筛选的比较土壤中分解尿素的细菌分解纤维素的微生物原理常用选择培养基进行筛选,即提供有利于目的菌株生长的条件,如营养、温度、pH等,同时抑制其他微生物的生长刚果红染色法,即在含有纤维素的培养基中加入刚果
7、红时,刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后,该复合物不能形成,培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈土壤中分解尿素的细菌分解纤维素的微生物筛选过程含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素1.根据微生物培养与应用的相关知识回答下列问题。(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染
8、,需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和
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