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时间:2019-06-25
《ABIVeriti梯度PCR仪使用说明》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、ABIVeriti梯度PCR仪使用说明基因有限公司GeneCompanyLimited操作步骤:1、打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管。盖好热盖。2、打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。3、初始化完成后,显示主菜单:4、点“Browse/NewMethods”,进入PCR程序列表:5、可以直接点一个PCR程序,选择“StartRun”运行;点右边的符号,可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:6、添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将
2、加入一段新的程序。7、修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。10、建立梯度模式:1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下2)点“VeriFlexstep”,出现梯度创建窗口:输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。注意
3、:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃!11、建立渐变模式:1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下2)点“AutoDelta”,出现渐变模式创建窗口。点“StaringCycle”,输入起始循环数;点“DeltaTemperature”,输入温度变化值;点“DeltaTime”,输入时间变化值。渐变模式适用于touchdownPCR,可以提高PCR反应的特异性。例:输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5s。12、增加暂停步骤:1)点中
4、一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下3)点“Pause”,出现如下窗口。输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。上图表示每隔10个循环暂停10s,在10个循环的第1个循环之前暂停。13、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。点“RunMethod”,输入PCR程序名称;点,选择保存PCR程序的文件夹(如果要保存在USB文件夹中,需要先插U盘)。再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行程序时可以修改)。点“SaveδExit”确定。14、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序。15、点“StartR
5、un”,出现运行参数设置窗口输入反应体积和热盖温度,点“StartRunNow”开始运行PCR程序。16、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口。A-运行状态栏,显示运行温度和剩余时间B-加热警示标记C-阶段指示D-步骤温度E-步骤时间F-步骤指示C-状态报告,显示日期、时间和仪器状态D-延伸箭头,点箭头可以显示更多的步骤16、暂停运行:点“PauseRun”,仪器暂停,出现暂停选项栏“RemainingTime”显示暂停剩余时间,“ElapseTime”显示已暂停时间。如果需要修改暂停时间,点,输入时间值,点“Done”确定;点
6、“ResumeRun”,结束暂停,继续运行PCR程序。17、终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序。18、反应报告:PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。该报告可以保存和打印。19、PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。并开盖放置,使热盖和加热模块正常降温。应用软件使用一、使用9700模式运行PCR程序Veriti和9700具有不同的升降温控制模式,但是在Veriti中可以通过模式转换,使仪器运行9700的升降温模式。对于已在9700上摸索好的PCR程序,可以直接在Veriti上运行,
7、不用再修改反应条件。1、在主菜单,点“ToolsManu”,2、点“ConvertaMethod”,3、选中“9700MaxMode”,点箭头输入9700上的PCR反应条件,设定PCR程序,点箭头4、在保存程序窗口,输入名称,选择文件夹保存程序。5、回到PCR程序列表界面,选择新建的9700模式PCR程序,运行程序。二、Tm值计算1、在主菜单,点“ToolsManu”,2、点“CalculateTm”3、输入盐浓度和引物浓度,在“Primer1Sequence”和“Primer2Sequence”分别输入引物的序列,再点“Calcul
8、ate”,软件计算显示Primer1和Primer2的Tm值。GeneCompanyLimited基因有限公司维修管理中心北京(010)51664076上海(021)64951899-230广州(020)85524840
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