梯度pcr仪使用说明

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1、ABIVeriti梯度PCR仪使用说明基因有限公司GeneCompanyLimited（声明：此说明仅供一般操作参考，未经厂家审核也不代表任何技术承诺，请以原版资料为准）操作步骤：1、打开PCR仪的热盖，插入0.2ml的样品管。盖好热盖。2、打开PCR仪的电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟。3、初始化完成后，显示主菜单：4、点“Browse/NewMethods”，进入PCR程序列表：1、可以直接点一个PCR程序，选择“StartRun”运行；点右边的符号，可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序，点“New”，出现PCR程序：2、添加一段程序：点中上方的“Stage”位置，该位

2、置变红；再点“Add”，软件将加入一段新的程序。1、修改循环数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定。8、增加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新的步骤。9、删除一个步骤：点“Step”位置，在点“Delete”，软件将该步骤删除。10、建立梯度模式：1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下2）点“VeriFlexstep”，出现梯度创建窗口：输入6个梯度温度，温度下方的“1－2”是指对应的1、2两行加热孔，全部输好后，点“Done”确定。注意：相邻的两个梯度温度之差

3、最大不能超过5℃！11、建立渐变模式：1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下2）点“AutoDelta”，出现渐变模式创建窗口。点“StaringCycle”，输入起始循环数；点“DeltaTemperature”，输入温度变化值；点“DeltaTime”，输入时间变化值。渐变模式适用于touchdownPCR，可以提高PCR反应的特异性。例：输入起始循环数为2，温度变化值为＋0.5℃，时间变化值为＋5s，则表示从第2个循环开始，每循环一次升温0.5℃，时间增加5s。12、增加暂停步骤：1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下1）点“Pause”，出现如下窗

4、口。输入暂停的起始位置，暂停间隔和暂停时间，点“Done”确定。上图表示每隔10个循环暂停10s，在10个循环的第1个循环之前暂停。13、编辑PCR程序完成后，点“Save”保存。点“RunMethod”，输入PCR程序名称；点，选择保存PCR程序的文件夹（如果要保存在USB文件夹中，需要先插U盘）。再输入反应体积和热盖温度（这两项在运行程序时可以修改）。点“SaveδExit”确定。14、回到PCR程序列表界面，选择新建的PCR程序。15、点“StartRun”，出现运行参数设置窗口输入反应体积和热盖温度，点“StartRunNow”开始运行PCR程序。16、仪器运行选中的PCR程序，

5、显示运行监视窗口。A-运行状态栏，显示运行温度和剩余时间B-加热警示标记C-阶段指示D-步骤温度E-步骤时间F-步骤指示C-状态报告，显示日期、时间和仪器状态D-延伸箭头，点箭头可以显示更多的步骤16、暂停运行：点“PauseRun”，仪器暂停，出现暂停选项栏“RemainingTime”显示暂停剩余时间，“ElapseTime”显示已暂停时间。如果需要修改暂停时间，点，输入时间值，点“Done”确定；点“ResumeRun”，结束暂停，继续运行PCR程序。17、终止运行：点“Stop”可以终止整个PCR程序。18、反应报告：PCR程序结束后，仪器会自动生成反应报告，显示当次反应的各项指

6、数。该报告可以保存和打印。19、PCR反应结束后，打开热盖，取出样品，关闭仪器电源。并开盖放置，使热盖和加热模块正常降温。应用软件使用一、使用9700模式运行PCR程序Veriti和9700具有不同的升降温控制模式，但是在Veriti中可以通过模式转换，使仪器运行9700的升降温模式。对于已在9700上摸索好的PCR程序，可以直接在Veriti上运行，不用再修改反应条件。1、在主菜单，点“ToolsManu”，2、点“ConvertaMethod”，3、选中“9700MaxMode”，点箭头输入9700上的PCR反应条件，设定PCR程序，点箭头4、在保存程序窗口，输入名称，选择文件夹保存

7、程序。5、回到PCR程序列表界面，选择新建的9700模式PCR程序，运行程序。一、Tm值计算1、在主菜单，点“ToolsManu”，2、点“CalculateTm”3、输入盐浓度和引物浓度，在“Primer1Sequence”和“Primer2Sequence”分别输入引物的序列，再点“Calculate”，软件计算显示Primer1和Primer2的Tm值。GeneCompanyLimited基因有限公司维修管理中心北京（010）