df-3絮凝剂产生菌培养条件的优化

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1、中国材料科技与设备(双月刊DF3絮凝剂产生菌培养条件的优化2008年·第6期DF3絮凝剂：产生菌培养条件的优化^j罗平，陈晓霞，李亚林，程士宝(重庆大学化学化工学院，重庆400044)摘要：从花园土壤中筛选到一株有絮凝能力的菌株编号为DF_3，在温度为3O℃，通气量(以摇床转速表示)为160r／min时通过实验确定DF-3的最佳培养条件：初始pH为8；20g／L果糖和5g／L葡萄糖为碳源；0．3g／L蛋白胨，0．5g／L酵母膏，0．5g／L尿素和0．2g／L(NH4)2SO4为最佳氮源；无机盐为2g／LKH2P

2、04，5g／LK2HPO4和0．1g／LNaC1。在这种条件下培养36小时所产微生物絮凝剂对高岭土悬浊液的絮凝率超过9O-。关键词：微生物絮凝剂；絮凝；培养条件；菌种鉴定中图分类号：Q93X7o35文献标识码：A测定其絮凝活性。r-0前言改变1．1．3发酵培养液中的pH，碳源，氮源，无机盐，按上述同样的方法制备微生物絮凝剂，测定其絮凝活性。微生物絮凝剂(MBF)是一种利用生物技术，通过微生物体或其分泌物发酵、抽提、精制而得到的一种安全、高效、1．2．2絮凝活性的测定无毒、无二次污染的新型水处理絮凝剂。克服了传统

3、的无机在lOOml的小烧杯中加入100ml的lg／L的高岭土悬浊和有机絮凝剂在使用安全和环境污染方面的问题口]，所以研液，lml的微生物絮凝剂(发酵液)，lml1的CaC1z溶液，究和开发微生物絮凝剂具有重要的现实意义和广阔的应用120r／min快搅1min，60r／min快搅3min，静置10min，用吸管前景。本文对凝剂产生菌DF一3培养条件的优化进行了研究小心取液面下2cm处的上清液于721型分光光度计550nm并对该菌进行鉴定。处测定吸光度，同时以未加絮凝剂的高岭土悬浊液作对照实验，并用以下公式计算其絮

4、凝率。1材料和方法絮凝率一(A_B)／A×100式中A为对照上清液在．550nm处的吸光度，B为样品1．1材料上清液在550nlTl处的吸光度。1．1．1菌种来源实验所用菌种是从重庆大学第八教学楼前的花园土壤2结果与讨论中分离而得到的。2．1DF一3的生长曲磊1．1．2实验仪器Xsp一16A犁光学显微镜THZ：C恒温振荡器，YⅪ一1型台式低速离心机，721分光光度计，GB40271—83煤电手提式高压蒸汽消毒器，DG／20—002台式干燥箱，TP一220A电子天§平，JJ一1电动搅拌器。1．1．3培养基墟初始发

5、酵培养基：葡萄糖20g，KH。PO2g，KHPO5g，(NH4)2SO40．2g，NaC10．1g，尿素0．5g，酵母膏0．5g，1000mL蒸馏水，自然pH。图1DF3的生长曲线1．2方法Fig．1ThegrowthcurvesOfDF-31．2．1培养条件的优化按上述1．1．3发酵培养液的配制方法配制发酵培养液，将菌株DF3接种于发酵培养液中，160r／min摇床培将培养液分装在50ml的锥形瓶中，每瓶装25m1，用棉塞塞养。每隔8h取样分析菌生长量(以OD。。表示)和发酵液对紧瓶口，在121℃灭菌20ra

6、in后，待培养液冷却接入所选菌高岭土悬浊液的絮凝率。结果如图1所示，培养初期菌生长种，于30℃160r／rain恒温振荡培养，每隔8h，取出培养液，迅速，此时其发酵液对高岭土悬浊液的絮凝率随培养时间而逐渐增大，培养36h时发酵液的絮凝活性最高，此后由于菌基金项目：重庆市自然科学基金资助项目(CSTC．2008BB7180)*作者简介：罗平(1966一)，女，副教授，博士研究生，主要从事环境微生物学及污水处理方面的研究。电话：023—65112804，E-mail：cstpw@163．com2008年·第6期技术

7、与研究中国材料科技与设备(X2月刊)体自融胞内物质排放到培养液中，其中的酶类降解培养液中知，随着碳源浓度的增加，絮凝率先增大后减小，当碳源浓度的活性物质，从而使絮凝活性逐渐降低。随着培养时间的增为25g／L，絮凝率达到最大为83．4，此后絮凝率逐渐降低，加，菌生长量不断增加，而当48h达到最大值，此后，由于细由此可见碳源浓度度并非越大越好，碳源浓度过低不能供给胞生长，’产物积累，培养液中的营养被大量消耗，营养的枯足量的物质和能量，而高浓度的碳源在微生物的生长和代谢竭，致使细胞的生长速率开始下降，菌生长量不再增加

8、。过程中会酸化，导致溶液pH值的下降，使微生物的生长和代谢受到抑制，同时高浓度碳源，使发酵液渗透压过高，细胞2．2“D卜3的最佳pH值失水，且添加过多的碳源也会导致培养基成本的升高，造成培养基的初始pH是影响微生物生长的主要因素，太高不必要的浪费。或太低均不利于菌体生长同时影响代谢产物的分泌l2。如图2所示，pH值在7～1O时，DF-3生长较好，分泌的絮凝活2．3～复合碳源的配比性物质