《真菌的实验诊断》PPT课件

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1、1真菌感染的实验诊断天津医科大学总医院胡志东E-mailhuzhidong27@163.com2真菌感染的危险因素：中心静脉插管尿道插管广谱抗生素气管插管腹部外科肠胃外营养营养不良住院时间感染之前定殖3医学重要的酵母菌分类SegalB,BowEJ,MenichettiF:InfectDisClinNAm2002;16:935-64条件致病的酵母菌念珠菌属非念珠菌属白念珠菌非白念珠菌热带念珠菌近平滑念珠菌光滑念珠菌克柔念珠菌季也蒙念珠菌葡萄牙念珠菌隐球菌属新型隐球菌毛孢子菌属白吉利毛孢子菌头状毛孢子菌酵母属酿酒酵母红酵母属4霉菌曲霉菌属非曲霉菌属

2、烟曲霉非烟曲霉黄曲霉黑曲霉土曲霉镰刀霉茄病镰刀霉尖孢镰刀霉赛多孢属尖端赛多孢多育赛多孢接合菌根霉属毛霉属根毛霉属梨头霉属小克银汉霉属暗色孢霉链格孢霉属万氏霉属双极菌属弯孢属医学重要的霉菌分类SegalB,BowEJ,MenichettiF:InfectDisClinNAm2002;16:935-645诊断方法影像学组织病理学/细胞学培养血清学分子生物学方法：PlateliaAspergillusELISAFungitellassayPCR（unavailable）传统的方法6TimeAxisofMethodsforDetectionofPulm

3、onaryAspergillosisCTpositive123456789101112131415chestX-rayantigenß-glucanculturehistologyPCRKamiMetal,ClinInfectDis2001;33:1504-127真菌病实验室诊断主要内容准确、快速检出真菌病原体真菌镜检真菌培养组织病理生理生化血清学方法分子生物学8真菌感染的诊断直接涂片真菌培养组织病理＋真菌培养是“金标准”9有意义的真菌培养标本非经口痰标本非插管尿标本血液或其他无菌体液(胆汁、胸腹水、脑脊液）10直接镜检的浮载液和染色剂KOH-

4、10~20%-皮肤标本Gramstain-真菌均为阳性Calcofluorwhite-荧光染色India-ink-墨汁染色LPCB-乳酸酚棉蓝Immunofluorescence-免疫荧光11直接镜检对痰、窦道排泄物及气管冲洗液等标本直接镜检可以看到透明分支的菌丝、脓血或痰太粘稠用10％KOH处理后再进行镜检如果曲霉菌寄生与空气相通的器官中，镜检甚至可以看到曲霉头菌丝有隔，呈二叉型，45℃分枝。12菌丝和孢子13直接镜检——酵母细胞14隐球菌病—直接镜检（墨汁染色）15有意义的涂片结果机体内部标本如血液、腹水、CSF、脓肿穿刺液等新鲜尿液见到大

5、量菌丝及孢子口腔、阴道、支气管灌洗液见到酵母样菌应作培养确定16多细胞真菌形态sporehypha17真菌培养18真菌培养检查目的—提高病原体检出的阳性率，确定致病菌的种类。意义——发现肯定的致病原如新生隐球菌时，诊断即可确立。—分离出条件致病菌如白念珠菌或烟曲霉，应结合临床情况进行判断。—无菌部位如血液或脑脊液中分离出条件致病菌常提示肯定的感染，但对来自于脓、痰或尿的标本则应谨慎解释结果。但任何一株培养物都不应轻易视为污染菌。需结合直接镜检的结果，强调直接镜检与培养检查相结合的重要性。强调临床医师与实验室检验人员之间的相互联系。1909220

6、区分酵母样或霉样菌落21Aspergillusfumigatus-ColonialMorphology,Sabouraud葡萄糖琼脂培养基烟曲霉菌22Aspergillusfumigatus-MicroscopicMorphology,100xLactophenolcottonblue(单列)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、分生孢子23Aspergillusflavus-在Sabouraud葡萄糖琼脂黄曲霉菌生长快黄色表面粉末状24Aspergillusflavus-MicroscopicMorphology,100xLactophenol

7、cottonblue黄曲霉菌(二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子25Penicilliumspecies-ColonialMorphology,Sabouraudagar青霉属气生菌丝密毯状26Penicilliumspecies-MicroscopicMorphology,400xLactophenolcottonblue青霉属(帚狀枝,分生孢子)27Aspergillusniger-ColonialMorphology,Sabouraudagar黑曲霉菌(背面)28Aspergillusniger-Microsco

8、picMorphology,100xLactophenolcottonblue(二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子29真菌体