《现代生物科技专题(选修三)》

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1、第十五讲现代生物科技专题(选修三)【考纲点击】1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础(Ⅰ)。9.胚胎干细胞的移植(Ⅰ)。10.胚胎工程的应用(Ⅱ)。知识互联网点击进入word常考点21基因工程(工具、原理及应用)(5年34考★★★)1.(2011·浙江理综,6)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大

2、肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是(  )。A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子高考经典解析:将ada通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶,每个大肠杆菌细胞中至少含有一个重组质粒,且每个质粒(重组质粒)至少含有一个限制酶识别位点,但每个限制酶识别位点只能插入一个ada,插入的ada成功表达,说明每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子。故C

3、错误。答案:C(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有和。(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是______________________________________________________________________。2.(2012·新课标,40)根据基因工程的有关知识,回答下列问题。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的

4、DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是,产物是。若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术。(5)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是________________________________________________。解析本题着重考查基因工程方面的知识。限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端,平末端和黏性末端。两种不同酶切割之后便于相连,所产生的黏性末端必须相同。E·co

5、liDNA连接酶可以连接黏性末端,T4DNA连接酶可以连接两种末端。反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用PCR技术进行大量扩增。基因工程中可以选用质粒、噬菌体、动植物病毒做载体。当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca2+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒。答案(1)平末端 黏性末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)T4E·coli(4)mRNA单链DNAPCR(聚合酶链式反应) (5)动植物病毒λ噬菌体的衍生

6、物 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱本考点各省市命题的要求不同,题型及赋分也不一致。江苏单科卷年年考且选择、非选择均出题;山东理综二选一,安徽卷、天津卷以及全国新课标卷往往以非选择性综合题形式出现;而浙江卷、全国大纲卷则以选择题形式命题。【押题】浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现,一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后,许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高,在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物

7、质或低毒甚至无毒物质,有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作,请回答下列问题。综合考查基因工程相关内容命题猜想(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有、。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指;步骤②用到的酶有___________________________________________________。(2)图中导入重组质粒的方法是,在导入之前应用处理受体细菌。(3)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入可将含有目的基因的细

8、胞筛选出来。(4)请你为该课题命名:___________________________________________________。破题关键解析进行基因工程操作时,首先要获取目的基因,其方法有多种:从基因文库中获取、人工合成目的基因或PCR合成等。在构建基因表达载体的过程中,用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶

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