《沙门氏菌培训》PPT课件

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1、沙门菌属（Salmonella）简介沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一。其病原沙门氏菌属肠道细菌科，包括引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。除可感染人外，还可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。特性沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌（比大肠杆菌细）。（0.7～1.5μm）×（2～5μm）散在。无荚膜和芽孢，都具有周身鞭毛（除鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外），能运动，大多数具有菌毛，能吸附于宿主细胞表面或凝集豚鼠红细胞。培养特性A需氧及兼性厌氧菌。B在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色

2、半透明、边缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无粪臭味）。C鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）：一般无色菌落。D三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。生化特性1）发酵葡萄糖，麦芽糖，甘露醇和山梨醇产气。2）不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。3）不产吲哚、V-P反应阴性。4）不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气，大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖。血清学特性沙门氏菌具有复杂的抗原结构。一般沙门氏菌具有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(Vi荚膜或包膜抗原)三种抗原。传播途径肉的污染肉及其制品的沙门氏菌检出

3、率美国为20%—25%、英国为9.9%、日本检查进口家禽的污染率为10.3%，国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%—39.5%。蛋的污染蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%，由于吃蛋引起鼠伤寒病的病例报告逐渐有增加的趋势。环境污染食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。传播问题恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。沙门氏菌检测标准—GB4789.4-2010增菌和选择性培养25g样品225mlBPW36℃8~18h培养1mlBPW增菌液+10mlSCTTB增菌液在42℃、SC增菌液在36℃各培养1

4、8～24小时1mlBPW增菌液+10mlTTB分别从TTB和SC增菌液中取1环，接种到BS和HE琼脂上培养BS琼脂在36℃培养40～48小时HE琼脂在36℃培养18～24小时分别从BS和HE琼脂上挑选可以菌落进行TSI初步生化鉴定可疑菌落判定HE琼脂BS琼脂XLD琼脂科玛嘉显色琼脂阴性科玛嘉显色琼脂阳性生化试验1、先从BS、HE或XLD或显色培养基上挑取可疑菌落。2、接种至TSI，先在斜面上划线，然后再底层穿刺。4、将TSI和NA至于36℃，18～24h培养3、将接种TSI完毕的接种针不要灭菌，直接在营养琼脂平板上划线。根据上表中可理解为只有在斜面和底层产碱、不产H2S、

5、不产气的情况下可不进行生化鉴定，直接判定为非沙门氏菌，其余任何情况均需进行生化鉴定。TSI鉴定三糖铁生化试验底层产H2S底层产酸斜面产碱斜面底层产酸产碱底层产酸斜面产碱底层产H2S产酸产气产酸产气产H2S只在TSI产碱的情况下可判定无沙门氏菌，其余任何情况均需进行生化鉴定生化试验1、准备一只2ml无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化鉴定套装。2、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，接种至生理盐水中，制成0.5个麦氏浊度。3、依次在各个安瓿（bu）瓶中滴加菌悬液3滴。4、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆盖。5、在36℃培养18～24h。菌悬液制备ORO

6、.5个麦氏浊度的菌悬液依次在每个安瓿瓶中滴加菌悬液2～3滴。第一步第二步第三步生化试验准备色氨酸肉汤赖氨酸脱羧酶肉汤氨基酸脱羧酶肉汤尿素酶氰化钾培养基氰化钾培养基对照甘露醇山梨醇β︱半乳糖苷色氨酸肉汤经36℃，18～24h培养后滴加靛基质试剂，片刻观察结果阳性为玫瑰红色。色氨酸脱羧酶及对照和氰化钾及对照转种结束后需滴加液体石蜡覆盖试验管方可进行培养。靛基质试验+时补做甘露醇山梨醇试验，试验阳性后进行血清学鉴定TSI-时，进行ONPG试验，ONPG阴性时进行血清学鉴定。H2S+、靛基质-、尿素-、KCN-、赖氨酸+后进行血清学鉴定。生化试验色氨酸吲哚试验阴性符合赖氨酸阳性对

7、照阴性0NPG阴性尿素酶阴性KCN及对照阴性甘露醇山梨醇阳性符合符合符合符合符合血清学鉴定沙门氏菌的分类沙门氏菌属分为两个种：肠道沙门氏菌(种)肠道亚种、萨拉姆亚种、亚利桑那亚种、双相亚利桑那沙门氏菌、豪顿沙门氏菌及因迪卡沙门氏菌(6个亚种)邦戈尔沙门氏菌(种)沙门氏菌的分类及命名-沙门氏菌的分类、命名沙门氏菌—抗原O抗原也称菌体抗原，是细胞壁的组成成分Vi抗原是一种特殊的菌体抗原，属于K抗原群（如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌都含有Vi抗原）H抗原（即鞭毛抗原）H抗原与抗血清的反应成絮状或绒状。大部分沙门氏