《氧化还原酶》PPT课件

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1、第8章氧化还原酶主要内容:一、过氧化物酶二、多酚氧化酶三、脂肪氧合酶四、葡萄糖氧化酶五、超氧化物歧化酶2021/8/241一、过氧化物酶(PODperoxidase)过氧化物酶是存在于各种动物、植物和微生物体内的一类氧化酶。催化由过氧化氢参与的各种还原剂的氧化反应。2021/8/2421过氧化物酶作用方式及分布1.1过氧化物酶作用方式过氧化物酶(供体:过氧化氢氧化还原酶)催化过氧化氢分解时,同时有氢供体参加。H2O2+AH22H2O+A酚类、胺类化合物、某些杂环化合物和一些无机离子等都可以作为过氧化物酶的供氢体。2021/8/2431

2、.2过氧化物酶分类(1)含铁过氧化物酶①正铁血红素过氧化物酶:含有正铁血红素Ⅲ为辅基,存在于高等植物、动物和微生物中。②绿过氧化物酶:绿过氧化物酶的辅基也含有一个铁原卟啉基团,这类酶存在于动物器官和乳中(乳过氧化氢酶)。(2)黄蛋白过氧化物酶:含有黄素腺嘌呤二核苷酸作为辅基,这类酶存在于微生物和动物组织中。2021/8/2441.3分布:过氧化物酶在植物细胞中以两种形式存在:①以可溶形式存在于细胞浆中②以结合形式在细胞中与细胞壁或细胞器相结合2021/8/2452过氧化物酶在食品加工中的应用(1)过氧化物酶是果蔬成熟和衰老的指标:如苹

3、果气调贮藏中,过氧化物酶出现两个峰值,一个在呼吸转折(成熟),一个在衰老开始。(2)过氧化物酶的活力与果蔬产品,特别是非酸性蔬菜在保藏期间形成的不良风味有关。(3)过氧化物酶属于最耐热的酶类,在果蔬加工中常被当作热处理是否充分的指标。2021/8/246方法:将已热处理的原料中抽取样品,横切,随即放入愈创木酚或联苯胺溶液中,然后取出,在切面上滴0.3%H2O2,数分钟后,用愈创木酚处理的样品变为褐色,联苯胺变为深蓝色,说明过氧化物酶未被破坏,热处理时间不够,如果均不变色,则表示热处理效果良好。POD的测定方法:2021/8/2473过

4、氧化物酶最适pH和最适温度3.1最适pH过氧化物酶一般都含有多种同功酶,因此最适pH范围较宽。酸性状态,过氧化物酶血红素和蛋白质部分分离,酶蛋白从天然状态转变到可逆变性状态,活力下降,且热稳定性低;在中型和碱性状态,酶处于天然状态,蛋白质结构含α-螺旋结构,稳定,酸化后α-螺旋结构破坏,产生β-结构。2021/8/248表8-1一些果蔬中的过氧化物酶的最适pH果蔬最适pH说明葡萄5.44.0~5.05.0~6.0柠檬酸磷酸缓冲液硼酸缓冲液0.2mol/L醋酸缓冲液0.1mol/L香蕉4.5~5.04.5阴离子部分阳离子部分菠萝青刀豆马

5、铃薯4.25.0~5.45.0缓冲液浓度(0.1~0.2mol/L)可溶态、离子结合态和共价结合态匀浆2021/8/2493.2最适温度 差异较大:35-60℃。不同来源的过氧化物酶在最适作用温度上存在着很大的差别。例如,马铃薯和花菜(均浆)中过氧化物酶的最适温度分别为55℃和35~40℃。2021/8/24104过氧化物酶的热稳定性4.1.热失活概念①双向性:POD中含有不同的耐热性质部分,不耐热部分在热处理时很快地失活,而耐热部分在同样的温度缓慢地失活。2021/8/2411在88℃热处理时甜玉米中过氧化物酶的失活(用邻-苯二胺作

6、为氢体底物测定酶活力)2021/8/2412②可逆性:经热处理后的酶液在室温或较低温度下保藏,它的活力部分可以再生。例如:辣根过氧化物酶在70℃加热1小时后,在30℃下再生的酶活力可达到处理前的30-40%,而在50℃下不能再生,如再降低到40℃时,酶活力又开始提高。2021/8/24134.2.过氧化物酶冷冻增活效应果蔬热烫后,有多少残余活力或再生活力被允许留在被保藏的产品中,残余酶活力在冰冻保藏后,质量比酶完全失活时要高。2021/8/24144.3.非脂肪氧合酶作用在热失活中过氧化物酶分子聚集成寡聚体,分子量增加一倍,这个过程包

7、括酶分子展开和展开的酶分子进一步堆积,血红素基暴露,增加了血红素蛋白非酶催化脂肪氧化的能力,导致不良风味的产生,这一过程非脂肪氧合酶作用(热烫钝化)。2021/8/24155影响过氧化物酶热失活的因素5.1.不同来源的POD具有不同的耐热性。一般来说,植物的过氧化物酶活力越高,它的耐热性也越高。比如马铃薯和花菜匀浆中的过氧化物酶在95℃加热10min就完全而不可逆地失活。而甘蓝中的过氧化物酶在120℃加热10min仍然有0.3%活力保存下来。2021/8/24165.2.低水分含量,POD耐热性增加:例如:水分含量低于40%时,谷类中

8、过氧化物酶的热稳定性与水分含量成反比。对于加工脱水果蔬有重要参考价值。2021/8/24175.3.外加因素:降低pH,增加NaCl浓度。以辣根中过氧化物酶为例,加入羟高铁血红素能降低酶的热失活速度(pH7.0、76℃)

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