《朱海平粪便涂》PPT课件

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1、粪便涂片兰州大学第一医院检验科朱海平粪便菌群涂片检查临床意义粪便中细菌数量、形态种类、比例与肠道菌群处于平衡还是失调状态有着密切的关系粪便菌群涂片能快速诊断肠道菌群失调，为早期预防、治疗提供线索菌群失调概念：指机体某部位正常菌群中菌种间的平衡被打破，菌种间的比例大幅度变化而超出正常范围的状态。这种状态进一步发展，机体出现一系列临床病症和体征，称为菌群失调症或菌群交替症什么会使菌群失调呢？菌群失调的原因抗生素的不合理应用（除抗生素本身毒副作用外）是主要诱因，杀灭致病菌的同时也杀灭有益菌，破坏了正常的微生态平衡，引起菌群失调。疾病：胃酸缺乏、肝硬化、胃肠

2、肿瘤等；其他：手术、激素、同位素、放射线和免疫抑制剂的大量使用，都可造成菌群失调肠道菌群的检测方法粪便涂片：革兰氏染色—G+紫黑色、G-浅红色显微镜观察细菌的总数、形态、比例等培养：需氧菌—埃希氏菌属、沙门氏菌属、志贺氏菌属等一、粪便直接涂片的优缺点1、优点：①设备简单②操作简单③时间短④形象直观，直接了解粪便菌群的“像”，熟练者对诊断菌群失调有较高的准确性。2、缺点：①检验者必须有一定的经验，否则易判断错误②主要是定性检查，确定分度较困难。二、操作技术1、涂片：将新鲜大便多处沾取直接涂抹在洁净的玻片上，粪便不可稀释以防细菌变形。标本务求新鲜，涂片厚

3、薄适宜2、外观：肉眼检查外观颜色、形状（若含有膜状物的大便应补做艰难梭菌培养）3、镜检：染色技术是诊断准确成功的关键，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌要对比鲜明。镜检时应将涂片视野全面观览，切不可看几个视野就计数或报告三、检查方法1、细菌总数观察菌群涂片首先要总览细菌总数，通过“比例概数法”进行判断。了解涂片上细菌的数量是增多还是减少，有无优势菌或真菌。细菌总数过多的情况较少见或不易引起重视，菌群失调时细菌总数多在正常、减少或消失。2、观察革兰氏阳性、阴性杆菌及球菌的比率改变G+杆菌：G-杆菌：G+球菌：G-球菌（包括球菌/杆菌）比率反映了粪便菌群的质素

4、，它一般不受粪便稀释或浓缩的影响，所以较细菌总数有更大的意义，更能反映菌群的本质和预后。3、计数方法选定有代表性视野中的部分区域作细菌分类计数，需要数100～200个细菌以求得比例。不同年龄的人的比例都不一样，一般杆菌与球菌比例约为75：25。各年龄组细菌比率平均值的正常参考值（%）年龄G+杆菌G-杆菌G+球菌G-球菌1d：30.7—61.538.5—60.90—2.20—0.012d：60.0—71.634.8—36.93.0—3.50—0.013d：66.9—82.716.0—31.41.3—1.60—0.055d：85.5—87.5111.0—

5、12.81.4—1.70.08—0.4半年：82.1—96.42.3—15.80.5—2.60.2—1.11岁：78.4—94.53.5—16.61.5—2.60.3—1.75岁：51.7—86.310.6—37.72.0—13.21.1—5.410岁：56.7—88.57.6—30.72.5—12.22.0—6.718—25岁：54.3—78.612.2—35.22.2—12.52.4—9.041—55岁：39.4—59.337.3—49.62.4—5.93.4—6.756—65岁：35.3—56.844.3—49.62.3—5.93.6—6.

6、766岁：34.5—55.226.1—49.62.8—10.93.3—7.4肠道菌群各类细菌的比例G+杆菌%G-杆菌%G+球菌%G-球菌%正常范围50.2-7423.5-442-130.5-9较正常增多75-8545-5025-305-10较正常明显增多＞85＞50＞30＞10较正常明显减少35-4030-35＜10＜5较正常显著减少＜20-30＜15-20＜2＜1杆菌：球菌（G+杆菌+G-杆菌：G+球菌+G-球菌）3-10：1细菌总数的评定标准每油镜视野细菌数评价(数个视野平均值）<10显著减少11-100明显减少101-500略减少501-50

7、00正常＞5000显著增多肠道菌群的种类99.9%厌氧菌G+杆菌：双歧杆菌、乳杆菌、梭状芽胞杆菌（产气荚膜杆菌、艰难梭菌、破伤风梭菌）等G-杆菌：脆弱拟杆菌等G+球菌：消化链球菌等G-球菌：韦荣球菌等肠道菌群的种类0.1%需氧菌G+杆菌：芽孢杆菌（枯草芽胞杆菌、腊样芽胞杆菌）G-杆菌：大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、普通变形杆菌铜绿假单菌等G+球菌：葡萄球菌、链球菌等G-球菌：奈瑟菌G-弯曲菌：空肠弯曲菌肠道菌群与人体健康1、有益菌或称共生菌：双岐杆菌、乳杆菌、优杆菌等2、中间菌：肠球菌、大肠杆菌、拟杆菌等，有益，也有害3、有害菌：铜绿假单胞菌、葡萄球菌、

8、梭状芽胞杆菌等正常女婴4个月，母乳喂养，蛋黄样正常软便，似纯培养的革兰氏阳性杆菌占95%以上，呈正常菌群涂片