DB440100T 37-2004 草菇菌种生产技术规程

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1、ICS备案号：1902004 DB广州市农业技术规范DB440100/T372004 草菇菌种生产技术规程TechnicalRulesofStrawMushroomGenusProduction 20040706 发布20040801 实施广州市质量技术监督局发布DB440100/T372004 前言本标准由广州市农业局提出。本标准起草单位：广州市白云区农业科学研究所。本标准起草人：曹裕汉、曹学文、曹湛才、宋占平、王爱民、庄必海、曾志忠。本标准首次发布时间：2004 年07 月 06日。IDB440100/T372004 草菇菌种生产

2、技术规程1范围本标准规定了草菇菌种的生产环境和生产技术管理。本标准适用于草菇各级菌种生产。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 5749 生活饮用水卫生标准NY 5099 食用菌栽培基质安全技术要求3生长环境草菇菌种生产的环境应符合下列要求：a)应远离有“三废”污染的工厂、生活区、禽畜养殖场等。b)应

3、选用清洁水源，水质符合 GB 5749 规定。c)应选择地势较高，排水良好的环境。菌种培养应在保温、保湿、通风和光照良好的室内进行。4生产技术管理4.1母种生产4.1.1培养基的配方去皮马铃薯 200g，葡萄糖 20g，琼脂 20g，蒸馏水 1000ml。4.1.2培养基制作4.1.2.1配制按配方将马铃薯切成0.5cm×0.5cm×0.5cm 左右的方形小粒，加入蒸馏水1000ml，置锅内（小铝锅或不锈钢锅）煮沸20min~30min，马铃薯熟而不烂，趁热用 4层沙布过滤，获得马铃薯抽提液，然后把琼脂加入抽提液中继续加热，边加热边搅

4、拌，直到琼脂完全液化，加入葡萄糖，补水至1000ml，充分搅拌均匀。4.1.2.2分装将配制好的培养基分装至Φ18mm×180mm或Φ20mm×200mm 的玻璃试管中，装量为每管8 ml ~15ml，长度为试管的 1/5左右。试管口应保持干净，随后塞入棉塞或硅胶塞，并用牛皮纸包扎。4.1.2.3灭菌将配制分装和包扎好的试管直立放在高压灭菌锅内加热灭菌。加热到0.05MPa时，打开排气阀，排尽锅内空气，待压力指针回到零点后，关闭排气阀。重复操作两次。当压力升到0.1MPa（温度为 121℃）时，维持30min 后停止加热，待指针回到零

5、点，再打开锅盖，取出试管，并趁热将试管倾斜摆放在桌面上，试管口比试管底部高 1cm~1.5cm，做成培养基斜面，斜面长度为试管长度的1/2~3/5。4.1.2.4灭菌效果检查将灭菌后的培养基置于 30℃±2℃条件下1d~2d检查有没有细菌或霉菌的菌斑。4.1.3消毒与接种1 DB440100/T372004 4.1.3.1消毒3将接种用具、培养基放到接种箱或超净工作台内。接种箱应用气雾消毒剂消毒，用量 5g/m ；有紫外线灭菌灯的，同时开启照射30min。超净工作台使用前应开机 30min预热。4.1.3.2接种消毒后进行接种。接种人

6、员要注意卫生、清洁，戴口罩，按无菌操作要求，手部和试管菌种表面要用70%~75%医用酒精消毒。将接种用具用酒精灯进行火焰灭菌，放于箱内支架上冷却后备用。在酒精灯火焰四周的无菌区进行接种操作。开始接种时，左手同时握着转接母种和待接斜面培养基，试管口置于酒精灯火焰上方3cm 处的无菌区，用右手迅速分别拔开试管棉花塞，并用接种钩在转接母种试管中挑取绿豆粒大小的菌种体迅速转接到待接斜面培养基内。接种位置为培养基斜面前端1cm 处，且菌种体菌丝面朝上。接种后迅速塞上棉花塞。将接种好的斜面培养基用牛皮纸包扎试管口，并贴标有菌号和接种日期的标签。标

7、签粘贴位置为距试管口 8cm处。4.1.4培养将接种后的试管置于30℃~32℃培养箱或培养室恒温培养5d~7d，当菌丝长满试管，并产生少量红褐色厚垣孢子时结束培养。4.1.5性状指标菌丝应呈灰白至黄白色，浓密粗壮，萌发生长快，分布均匀，气生菌丝旺盛，爬壁力强，菌丝分枝角度大，能产生大量红褐色的厚垣孢子。4.1.6保藏在 15℃~20℃下保存，每隔 2~3 个月转接一次。每个菌株最多转接 4 次。4.2原种生产4.2.1栽培基质的要求应符合 NY5099 的规定。4.2.2培养料配方棉籽壳 100kg、麸皮 6kg~8kg、生石灰 4k

8、g~5 kg、料水比 1:1.4~1.5、pH 值为 8.0~9.0。4.2.3堆制发酵将培养料按配比混合，预湿后起堆，堆沤发酵4d ~5d，中间翻料一次。装料时检查pH 值不低于8.0~9.0，料含水量 60%~65%