活细胞提取和HPLC - MS分析预测中药生物活性成分

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1、活细胞提取和HPLC-MS分析预测中药生物活性成分李松林一，李平，一，，良闳奢嗯一，瑞燕丽一，连闻柒一和陆雍喳嗯一一药科大学重点实验室中国近代中国药品，药学教育教育部中华人民共和国和系，南京210039，中国收到2005年9月3日; 修订了30件2005年12月 接受06年1月5日。 可在线2006年2月20号。摘要一个新的战略，提出了在传统的生物活性成分，用于预测中药（中医）利用活细胞提取和高效液相色谱二极管阵列检测质谱法（HPLC-DAD的-MS）分析。这个假设是，当细胞一起孵育减少中药提取物

2、，成分中的潜在活性中医应该有选择的细胞结合，在悬架和细胞组分的相对浓度相结合的培养基应，而细胞结合部分将提取物中检出变性细胞。结合部分的细胞的身份，可确定的HPLC-DAD的质谱分析。使用该方法，所用的中药活性成分的潜在当归补血，常用汤贫血，它的成分，黄芪当归当归和黄芪的内皮细胞，进行了调查。六化合物的提取物汤当归补血检测元件的结合选择性内皮细胞，其中两个是由药材贡献当归当归，黄芪及四个基数。生物活性化合物的潜在身份的四个六分别鉴定为ononoside，毛蕊异黄酮，三丁基苯酞和藁本内酯的HPLC-

3、DAD的质谱分析。结果表明，该方法可用于预测候选人中医药的生物活性。关键词：活细胞萃取高效液相色谱法，二极管阵列质谱;预测生物活性成分;当归补血汤，黄芪，黄芪当归当归文章概要1。简介2。实验2.1。中药材和化学品2.2。样品制备2.3。细胞培养2.4。内皮细胞提取2.5。高效液相色谱分析3。结果与讨论3.1。生物活性当归补血汤候选人和血管内皮细胞中的成分为3.2。当归补血汤鉴定候选人的生物活性和血管内皮细胞的成分为4。结论致谢参考文献1。简介传统中药）中药（是中国传统的天然治疗的医疗理念的指导下使

4、用的补救措施，并已订明中医界在中国及全球华人对几千年的历史。中医主要是结合使用，其中复合公式将产生协同作用或拮抗作用[1]。在大多数情况下，中药活性成分没有或只是部分而闻名。因此，筛选和分析中药成分的生物活性是非常重要的，不仅为阐明其治疗原则，而且为他们的质量控制。为寻找中药活性成分的提取与传统的程序是从中药成分精制在体外或体内药理筛选，纯化后的化合物。虽然可能的化合物数量有限的中药药效负责，在生物活性化合物通常含有高达数百甚至不同的组件，这使得纯化和生物活性成分的筛选非常困难的数千复杂混合物。基

5、于这一假设的活性成分应该会出现在血液和尿液中适当的血浓度，Homma等人尿排泄，利率后，中医药管理局。介绍了生物活性成分的中药药代动力学的概念把他们的研究发现[2]。这的确是一个概率的策略与可吸收生物活性更高的发现候选人。但不保证可吸收生物活性的化合物。现代药理研究表明，药物作用的一个重要步骤，是具有约束力的一些受体和（或）通道（或）酶，细胞膜和（或）细胞内。因此，有能力与细胞相互作用的药物是非常重要的活动是为生物。基于这一原则，一些方法称为细胞膜色谱（CMC）的[3]和额亲和层析（刚果）[4]，

6、其中，固定化细胞包埋膜受体或抗体作为液体色谱固定相，分别混合开发的在线或化学药物的研究和生物的迅速屏幕的候选人从复杂的分离和鉴定铅药物[3]，[5]，[6]，[7]，[8]和[9]。最近，这些方法被聘用为有前途的方法从天然中药有效筛选的先导化合物或候选药物资源，包括[3]，[5]，[10]，[11]和[12]。然而，固定化包埋生活受体或细胞膜等，很短（1天到1周）[3]，以及包封或固定程序必须适应该种材料要分析和所用种凝胶基质[13]。此外，亲和组件的交互或生物膜中西医之间的兼容受体是很少的色谱分

7、离。此外，管委会不能直接连接到质谱在洗脱溶剂，因为目前存在的盐在高浓度的无机，中央军委以致于难以保留一个重要组成部分的网上身份与阐发。最近，董等人。[14]提出了一种新的方法使用中药活性成分的筛选和分析细胞膜萃取和高效液相色谱质谱法（HPLC-MS）分析，这是成功地应用于预测潜在的生物活性在多个化合物当归冬虫夏草同时进行。令人兴奋的结果表明，该方法具有优势，中医对常规方法进行调查潜在的生物活性成分：这种方法首先，通过筛选，化合物感兴趣的数字相比减少将是极其中药，在复杂的混合物的原，这将使进一步调查

8、更具成本效益;第二，高效液相色谱，质谱分析，不仅化合物的分离高分辨率，但也有兴趣的能力组件的身份鉴定的;第三，这种方法避免或固定程序的包封细胞膜，其中专业，耗时而艰巨的工作。又是如何的结果，如果裂解细胞膜是活细胞所替代，作为活细胞的情况下，都是该生物体细胞更多类似高于裂解细胞膜，使细胞复合互动更加类似于在生物体，导致生物活性的概率很高的候选人。因此，在本研究中，提出了新的战略生物活性成分的筛选和分析中药使用活细胞提取和高效液相色谱二极管阵列检测质谱法（HPLC-DAD的-MS）分析