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1、DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2009.04.005第24卷第4期北京农学院学报Vol.24,No.42009年10月JOURNALOFBEIJINGUNIVERSITYOFAGRICULTUREOct.,2009糖类物质测定方法评价＊杨柳,王建立,王淑英,路苹(北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206)摘要:糖类物质是生物样品中的重要组成部分,在生命代谢中起着主要作用。糖类物质测定在生命科学研究领域中有着重要意义。笔者论述糖类物质测定的主要方法,评价各种糖类物质测定方法的技术特点。关键词:糖类物质;测定方法;评价中图分类号:Q53
2、文献标志码:A文章编号:1002-3186(2009)04-0068-04AReviewonDeterminationMethodsofSugarContent＊YANGLiu,WANGJian-li,WANGShu-ying,LUPing(NewTechnologicalLaboratoryinAgricultureApplicationinBeijing,BeijingUniversityofAgiculture,Beijing102206,China)Abstract:Sugarcontentdeterminationisimportantinlifesciencestudy.Thi
3、spaperreviewsmethodsusedinthedeterminationofsugarcontent.Theadvantageandsuitabilityamongthemethodsarediscussed.Keywords:sugarcontent;determinationmethods;review碳水化合物统称为糖类物质,是由碳、氢、氧三种元素组性酒石酸铜甲液、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化成的一大类化合物,也是蛋白质、脂肪代谢的必要物质,并且铜沉淀,该沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶是人体必需重要营养元素之一。碳水化合物的含量测定是性酒石酸钾钠铜络合
4、物。酒石酸钾钠铜具有氧化性,在加热生物化学和其他生命学科、食品检验、临床检验、疾病诊断和条件下,能将还原糖氧化成醛酸,本身还原为氧化亚铜沉淀。质量检验中的一项重要工作。了解掌握糖类物质的各种测反应终点用次甲基蓝指示,次甲基蓝是一种氧化还原指示定方法的原理和技术特点,对在科研实际工作中选择适宜的剂,其氧化型为蓝色,还原型为无色,它的氧化能力比Cu2+分析方法具有重要的指导意义。弱,待还原糖将二价铜全部还原后,稍过量的还原糖则可把碳水化合物种类较多,按其组成特征可分为单糖、低聚次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。试样糖(寡糖)和多糖三大类。由糖苷键结合的糖链,超过10个经除去蛋白质
5、后,在加热条件下,以次甲基蓝作指示剂,滴定以上的单糖组成的聚合糖称为多糖,低于10个单糖的短链标定过的碱性酒石酸铜液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石聚合糖称为寡糖;按理化性质可分为还原糖和非还原糖,可酸铜溶液),根据样品液消耗体积计算还原糖量。溶性糖和不可溶性糖;转化糖等。糖类分子中含有游离醛基直接滴定法是GB/T5009.7-1985方法中的第二法和或酮基的单糖和含有游离醛基的双糖都具有还原性,葡萄GB/T5009.7-2003方法中的第一法。它是在蓝-爱农容量法糖、果糖、乳糖和麦芽糖等都是还原糖,其他双糖(如蔗糖)、的基础上发展起来的,其方法特点是试剂用量少,操作和计低聚糖乃至多糖(如糊
6、精、淀粉等),其本身不具有还原性,属算都比较简便、快速、滴定终点明显[2]。但因色素干扰影响于非还原性糖,但非还原性糖都可以通过水解而生成还原性滴定终点的观察,故不适于检测深色样品。臧瑾康等人改进的单糖,测定水解液的还原糖就可以求得相应糖类的含量。还原糖测定的国标方法,用费林试剂(酒石酸钾钠铜络合物)因此,单糖是糖类物质的基础,通过测定单糖的含量,可相应的深蓝色溶液的颜色消失至呈K2FeCu(CN)6的浅黄色溶液换算为总糖、双糖及多糖。单糖具有还原性,还原糖测定是作为终点,其方法与国标直接滴定法无显著性差异,减少终一般糖类测定的基础[1]。糖类物质测定方法很多,主要方法[3]点误差,简化操
7、作。包括有容量法、分光光度法、酶分析法、色谱法和旋光法等。直接滴定法所用的碱性酒石酸铜溶液配制方法不同于蓝-爱农容量法和高锰酸钾滴定法,配制方法:甲液15.00g1容量法硫酸铜及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL。1.1碱性铜盐定糖法的测定原理和方法特点碱性铜盐方乙液50.00g酒石酸钾钠及70g氢氧化钠溶于水中,再加入法主要用于测定还原糖。碱性铜盐溶液即为费林氏试剂,由4g亚铁氰化钾,完全溶解后稀释至10
