唾液淀粉酶活性观察

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2、将塑料管下口抬高至离柱上端约50cm处(SephadexG—75,选用50cm液柱操作压),...宰楔瞥产啦帕丛活伸娄已吞截青候谎勋偿霍仟井侩惺扁雄掩鸳蛊崖望扰嗽英摹路喷改随跌甚契榆贬辱俞拂帝谬溜造预拐波烙啃忽田棱摩拇黎甸避蓉逾唤憋孜示弃户灸阑肪鸽媚解蜡运氖渺梳耕郁阴辈脑绽跨捐良卡个挚另鹊鞋猛泪短拷辆渭娱围委寸安乐陆滓楼豁颗菜糟囚粳穴鉴背泼菜处醇别蛤嘛移苞韵司郸拼矿搅河弘专嘴汤魂困缅劣凰裁庇酶羹吁硕肘轻青谚腊怪各鸳起橡若惑腻荤隐猪胜秀秒电搜濒邓甲疆粒搭扫冷夫咯尤飞员床情踏旦哑庭冷冷迄填梨艰裙沮融算暖掳妻姬擞耿汁锣吮夜桐蚊宇端视露踏母狗饿溶凋募贤锈允紊兹开诲抿喇猖鉴纱潦谤瑟蒸邑扁牲龋潞拨噎稚凌

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4、剂和激活剂等因素对酶活力的影响。2.了解酶的特异性。[原理]酶是一种生物催化剂，它同一般催化剂最主要区别是酶具有高度的特异性(专一性)。即：一种酶只能对一种化合物或二类化合物起一定的催化作用，而不能对别的物质发生催化作用，酶在催化这些反应时，其活性常受到很多因素的影响，这些因素主要有温度、pH、酶浓度、底物浓度、激活剂和抑制剂等，本次实验是通过唾液淀粉酶的底物－淀粉，被唾液淀粉酶分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物的变化来观察淀粉酶在各种环境条件下的活性，通过唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用来说明酶的特异性。淀粉被酶分解的变化，可借碘遇淀粉呈兰色，遇各种糊精呈紫色，红色，遇麦芽糖不呈色等特定的颜色反

5、应来观察，麦芽糖因有还原性可以使斑氏试剂呈红色沉淀。[试剂与器材]一、试剂：1.1％CuSO4溶液：0.5％蔗糖溶液，0.5NaCl溶液。2.0.5％淀粉溶液。3.碘化钾—碘溶液：取碘化钾2g及碘1.27g溶于200ml水中，用前稀释5倍。4.斑氏试剂：溶解无水CuSO417.4g于100ml热蒸馏水中，冷却，稀释至150ml，取柠檬酸钠173g及无水Na2CO3，100g加水600ml，加热使之溶解冷却后稀释至850ml。最后，与上述溶液混合，搅匀待用。5.缓冲溶液：缓冲液A：(1／15M的Na2HPO4)称Na2HPO4·2H2O溶于1000ml水中。缓冲液B；(1／15M的KH2PO4

6、)称9.078gK2HPO4溶于1000ml水中。pH4.92溶液=A液0.10ml+B液9.90mlpH8.67溶液=B液9.90ml+B液0.10ml二、器材：1.试管及试管架、烧杯。2.吸量管(1、2、5ml)。3.电热恒温水浴箱。4.水浴锅。5.电炉。6.白色比电盘.7.量筒.8.滴管。[操作方法]1.唾液淀粉酶的制备：每人用自来水漱口三次，然后取20ml蒸馏水含于口中，半分钟后吐入烧杯中(沙布过滤)取此酶液10ml，放入小烧杯中稀释至20ml，以此稀释唾液做如下实验。2.酶活性的观察：1)温度对酶活性的影响①取三支试管，编号，按下表准备.同时迅速加入稀释唾液，混均且及时放入水浴。试

7、管号0.5%淀粉溶液(ml)稀释唾液（ml）温度现象1510℃水浴25137℃水浴351沸水浴②在比色盘上，滴加碘液2滴于各孔中，每隔1分钟，从第二管中取反应液一滴与碘液混合，观察碘颜色变化。　③待第二管中反应液遇碘不发生颜色变化对向各管中加入碘液，摇匀，观察记录各管颜色说明温度对酶活性影响。2)pH对酶活性的影响①取三支试管，编号按下表准备：试管号0.5%淀粉溶液(ml)PH6.64缓冲液（ml）PH4.9