《干扰素释放试验》PPT课件

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1、Y-干扰素释放试验的临床应用Y干扰素释放试验(interferon．1releaseassays），IGRA是检测结核分枝杆菌(MTB)特异性抗原刺激T细胞产生的Y干扰素，以判断是否存在MTB的感染。IGRAs可弥补PPD试验的不足，目前多个国家已将其用于诊断MTB潜伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我国部分医院也已常规开展此项检测受到MTB抗原刺激致敏的T细胞再次遇到同类抗原时可产γ干扰素IGRAs通过检测全血或分离自全血的单核细胞在MTB特异性抗原刺激下产生的γ干扰素，判断受试者是否感染MTB目前国际上较成熟的IGRAs有2种：(1)全血法：采用

2、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测全血中致敏T细胞再次受到MTB特异性抗原刺激后释放的1．干扰素水平，称之为全血检测或结核感染T细胞免疫检测；(2)细胞法：采用酶联免疫斑点技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)测定在MTB特异性抗原刺激下，外周血单个核细胞中能够释放1一干扰素的效应T细数量，称之为细胞检测或结核感染T细胞检测。上述2种检测方法的原理类似，检测技术和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl区基因编码抗原多肽作为特异性抗原，主要相对分子质量为6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相对分子质量为10000的培养滤液蛋白(CFP一10)抗原或

3、抗原多肽T-SPOT试验γ干扰素检测阴性γ干扰素检测阳性TB抗原多肽T细胞活化T细胞γ干扰素30IGRAs的结核特异免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB复合群，而在卡介苗和大多数NTM中缺失，因此IGRAs的特异度较好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少数几种NTM中，如堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、转黄分枝杆菌和胃分枝杆，故IGRAs阳性不能排除上述几种NTM感染的可能。PPD试验与IGRAs的对比PPD试验作为诊断MTB感染的传统方法，具有操作简便、成本低廉的特点，至今仍广泛使用，但该方法使用的PPD抗原成分复杂，易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌(nontub

4、erculosismyeobacterium，NTM)的影响，特异度较低，且对人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重症疾病患者等免疫功能受损人群的敏感度不足。荟萃分析结果显示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD试验，但IGRAs(尤其是细胞检测)受CD4+T细胞数量的影响小于PPD试验，这可能因为IGRAs检测过程已对单个核细胞数量进行了标准化，即在检测程序上消除了淋巴细胞数量减少对检测结果的影响PPD阳性对以下情况无法区分卡介苗预防接种√非结核分枝杆菌感染√LIBI√活跃结核病√结核病治愈、自愈后√IGRAs阳性卡介苗预防接种ⅹ大多数非结核分枝杆菌感染ⅹLIBI√活跃结核病√结

5、核病治愈、自愈后√2010年全国结核病流行病抽样调查结核分枝杆菌复合群77.1%，非结核分枝杆菌22.9%2010年广州结核病流行病抽样调查：非结核分枝杆菌19.3%，且其中前5位IGRAs为阴性的IGRAs的敏感性和特异性美国FDA认证临床实验数据：经培养确诊的结核病患者样本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特异性97.1%（297∕306）对活动性结核病的辅助诊断：PPD试验和IGRAs均无法区分LTBI和活动性结核病患者。国内IGRAs的研究数据显示其敏感度和特异度差别较大，敏感度为53％一98％，特异度为60％～90％(或以上)，但多数文献报道的敏感度和特异度

6、>70％，提示IGRAs的特异度优于PPD试验。IGRA用于诊断肺结核：深圳第三人民医院的结果例数（n）ELISPOT(+)n(%)结核患者24461846（75.47）急性播散型肺结核5851（87.93）继发性肺结核18381389（75.97）结核性胸膜炎538428（79.55）结核性脑膜炎5940（67.80）其他肺外结核356275（77.25）陈旧性肺结核5624（42.86）健康对照42265（14.20）新发肺结核密切接触者384136（35.4）IGRAs检测活动性结核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性还未高到阴性可以排除结核病的程度存在假阴性，阴性并不能排除结核病IG

7、RAs检测结核疑似病例的特异性不高IGRAs不能区分活动性肺结核和潜伏期结核感染（阳性不一定是活动性肺结核）存在假阴性，阴性并不能排除结核病IGRAs阳性时不能肯定诊断，阴性时不能排除诊断WHO不推荐中、低收入国家在诊断活跃结核感染时使用IGRAs中国的国情适用IGRAs吗？中国结核病发病率高WHO不推荐中、低收入国家在诊断活跃结核感染时使用IGRAsY-干扰素释放试验在中国应用的建议我国一方面是结核病高负担