谷胱甘肽对山葵愈伤组织诱导效应的观察

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1、谷胱甘肽对山葵愈伤组织诱导效应的观察学院成人教育与职业技术学院专业园林技术专业学号08456057姓名伊东晓指导老师胡孝义汇报内容1.实验目的及意义2.技术路线3.实验材料与方法4.实验结果及分析5.小结与结论6.研究展望1.实验目的及意义实验目的研究在山葵组织培养中，谷胱甘肽对外植体的愈伤组织诱导、发育的影响。实验的意义谷胱甘肽对促进细胞分裂有很大作用，如果实验成功，则能培育出更为茁壮的外植体。2.实验的技术路线通过方案对比的方法，即基本培养基（J1）和在J1中分别加入硝酸银（AgNO3）、谷胱甘肽（GSH）、水解酪蛋白（CH）构成

2、的优化方案（YH），即YH1、YH2、YH3，通过对愈伤组织形态的观察，获得初步结论。3.实验材料与方法实验材料实验中选择的外植体是山葵的叶片及叶柄。外植体消毒将外植体放在灭菌纯水中冲洗2~3次，用2.75%酒精浸泡30s，再用灭菌纯水冲洗3~4次，用0.1%升汞浸泡10min，最后再用灭菌纯水冲洗3~4次即可放在超级工作台上备用。培养条件培养温度为26摄氏度，暗光培养。培养基配比基本配方（J1）固体1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+3%蔗糖+0.7%Agar优化配方1（YH1）基本配方+3mg/LAgNO3（

3、硝酸银）优化配方2（YH2）基本配方+0.1mMGSH（谷胱甘肽）优化配方3（YH3）基本配方+500mg/LCH（水解酪蛋白）4、结果与分析实验结果J1外植体叶片及叶柄均长出了愈伤组织，但没有明显的粗大，生长的速度也一般，没有褐化现象的产生。YH1外植体叶片及叶柄长出愈伤组织的速度较快，并且比J1中的要大，基本无褐化现象。YH2外植体的叶柄由于谷胱甘肽的作用变得粗大，但是整体上愈伤组织不多且较小，长势也较慢，并且有褐化现象的产生。YH3外植体基本未长出愈伤组织，只是膨大，并且褐化严重。在图片中可以发现，叶柄由GSH作用变得粗大,但叶

4、片长出愈伤很小，褐化很多，叶片膨大也不厉害。基本培养基J1与加入GSH的优化培养基YH2相比，J1中叶柄长出的愈伤组织较多，但不及YH2中的外植体粗大；YH2中愈伤组织较少，但是叶柄因了GSH的作用很粗大，不过，有褐化现象出现。优化方案1即YH1中愈伤组织长势良好，而且也无褐化现象的出现；优化方案2即YH2中愈伤组织少而且生长缓慢，并且有褐化产生，不过叶则比较粗大。优化方案2（YH2）有愈伤组织产生，叶柄粗大，但又少量褐化产生；优化方案3（YH3）褐化严重，叶片、叶柄均只有膨大，基本未长出愈伤组织。5、结论（1）添加了AgNo3、GS

5、H、CH的优化培养基从整体讲比基本培养基对愈伤组织的诱导、外植体的生长作用更明显。（2）在三种优化方案中，YH1（加入AgNo3）所起到的效果是最好的，不仅能产生愈伤组织，而且也没有明显的褐化现象。（3）YH3（加入CH）实验结果是最差的，外植体基本上未长出愈伤组织，并且褐化现象严重。（4）YH2（加入GSH）实验结果差强人意，外植体能够长出愈伤组织，也较粗大，但是褐化现象也挺严重。讨论谷胱甘肽在组织培养中对促进细胞分裂有明显的作用，但是，实验过程中却易造成污染，出现褐化现象。因此，如果能很好的解决好这一问题，将会节约很多时间，收到很

6、好的效果，这是在以后的工作中需要探讨的并努力的。6.研究展望谷胱甘肽被誉为“抗氧化物之王”，具有抗氧化作用和整合解毒作用，对促进细胞分裂也有极重要的作用；山葵是一种高级辛香调味品，发展山葵产业具有很高的经济价值和社会价值。运用组织培养技术大力发展山葵产业，是必由之路，亦是捷径。致谢首先，要感谢胡孝义老师，他在我们论文写作过程中给予了极大的帮助，指导，同时，也正因为有了老师的严格要求，在论文写作过程中我们也有许多深刻的记忆。还有大杨店实验室里的许工程师，她也给予了我们许多帮助。同时，也要谢谢各位给予过我帮助的同学们：邬萌萌师姐，小熊师姐

7、，小郑师姐，崔珺同学，许红同学，叶洋国同学，葛德平同学，汪苗慧同学，彭嘉琪同学等等，是他们的帮助与鼓励，让我能有饱满的精力来完成论文的写作，谢谢！最后，要感谢三年来一直关心支持着我们的院里的各位领导及老师们。感谢所有关心支持着我的人们！