一、设备名称、技术参数及功能要求

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1、一、设备名称、技术参数及功能要求:设备名称:单细胞Western分析系统统英文名称:Single-CellWesternsystem1.工作条件1)工作温度:4°C-35°C2)相对湿度:20%-95%,无冷凝水3)仪器运行的持久性:仪器可连续正常运行。4)工作条件及安全性要求符合中国及国际有关标准或规定。2.设备用途及功能1)可做到单细胞蛋白表达分析2)肿瘤细胞异质性、免疫学、干细胞异质性及其分化发育、免疫反应分化、免疫细胞极化、精子、卵子、胚胎等蛋白质检测和CTC研究等。3.技术规格3.1细胞大小:直径7-25um细胞3.2样本类型:10000个

2、左右的哺乳动物浮选细胞。3.3细胞类型:神经细胞,淋巴细胞,干细胞、肿瘤细胞,红细胞等。3.4样本捕获数量:1000-2000个细胞3.5检测蛋白大小范围:15-175KD。3.6分子量分辨率:不同荧光10%分子差异,相同荧光30%分子量差异。3.7目标蛋白个数:单次2-4个蛋白,可反复洗脱10次,再杂交。3.8芯片单元:蛋白分离泳道长度不大于900μm。3.9泳道宽度:30μm。3.10裂解时间:10-15s3.11电泳时间:45-90s3.12UV蛋白捕获时间:4mins3.13芯片规格:3种3.14实验全程时间:4-6小时。3.15抗体:用于W

3、B的抗体及荧光二抗。3.16电泳电压:240v3.17标配532nm绿色激光和635nm红色激光3.18焦深:64μm3.19顺序扫描,独家非共焦设计,实时PMT增益调节,3.208位滤片轮3.21分辨率:5-100μm3.22芯片可储存9个月,在此期间可以不断测试不同靶点3.23配备品牌电脑,主流配置2.产品基本配置要求:系统主机一台、扫描仪一台、配套软件分析系统一套、装机试剂盒一套5.技术及售后服务1)保修及维修:设备验收合格后保修1年,终身维修。2)培训:安装同时现场培训,掌握基本操作;免费两人次参加每季度举办的进阶培训。6.建设必要性单细胞W

4、estern分析系统是当前供的供研究人员深入探究肿瘤组织和分选的干细胞亚群等样本中肿瘤异质性的必备工具平台。本平台主要的研究方向有:肿瘤学相关研究、干细胞及发育研究、免疫学研究和CTC等学科门类。Westernblot技术自1979年问世以来,一直成为蛋白质水平研究的必备工具,其技术平台的优势和应用范围已不言而喻,但经过几十年的发展,该平台的理论技术创新却未得到长足发展和改进,科研人员仍停留在对总蛋白的样本进行定量分析,无法实现单个细胞的蛋白样口进行检测。伴随着后基因组时间的不断发展和完善,以及精准医疗的大力创新与突破,在单细胞检测上成为无法跨越的鸿

5、沟,诸多的异质性的研究给western技术带来新的问题和挑战,当前在肿瘤的研究中,无法回避对肿瘤异质性的研究,同时,也会相应涉及免疫学和干细胞的深入发掘,相关研究方向有:1)不同肿瘤干细胞克隆产生的肿瘤细胞在基因组及蛋白质组存在差异,肿瘤干细胞具有和正常干细胞类似的表面标志物及使用类似的分化信号通路以及干细胞差异分化现象等。2)干细胞基因和蛋白的表达差异(尤其转录因子)对于干细胞的自我更新,分化成特定系细胞具有重要意义。3)在免疫系统研究中,机体在受到在微生物感染,肿瘤环境,自身免疫病,及其他炎症情况下,机体免疫细胞受到不同因子刺激(不同细胞因子,趋

6、化因子,神经递质等),分化/极化为不同功能的免疫细胞,不同免疫细胞,分泌不同细胞因子等,具有促进炎症/免疫,或抑制炎症/免疫的功能,不同免疫细胞其表达的基因,蛋白具有非常大的差异。分析不同生理/病理情况下免疫细胞的异质性,极其蛋白表达,可以有助分析机体的免疫状态,预测疾病转归,设计治疗方案及开展药物研发。4)干细胞能够无限增殖且存在很大的异质性,也可分化和发育为机体数百种不同的细胞类型。干细胞基因和蛋白的表达差异(尤其转录因子)对于干细胞的自我更新,分化成特定系细胞具有重要意义。单细胞Western分析系统的问世完全迎合当前精准医学的发展需要,可实现

7、分析肿瘤细胞蛋白质表达的异质性,分析肿瘤细胞异质性。巅履了传统Western对总蛋白的样测,无法细化到个体差异的局限,可实现研究人员深入洞察单个细胞的表达异质差异问题,针对特点的靶点,物定药物等因子处理后观察靶点的修饰细微变化,且灵敏度高,自动化检测,方便快捷,无论是科研还是临床以及转化医学平台都将具有十分重要的意义,可实现科研与临床的有效契合。目前国内同类产品只有传统的总蛋白定量免疫印迹系统,尚无可实现单个细胞的Western的检测手段,缺乏对单个细胞的深入认识,在精准医疗研究上仍处于起步阶段。而国内省内高校的基础医学、细胞生物学、肿瘤学等相关研究

8、用的也通常都是进口前沿设备,目前,该设备在国内外已经有部分相关科研系统购置或采购之中。综上所述,单细胞Wes

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