《DNA复制公开》PPT课件

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1、2001年2月2日,杭州西湖区西溪路某公司附近发生一起杀人分尸案。现场只发现了两块非常细小的尸块,此外并未留下任何痕迹。由于获得的DNA片段过少,未能证实这两块尸块到底是不是同一人的。在本案中,PCR仪器起到了什么作用?技术人员DNA片段送到刑侦支队利用一种叫PCR的仪器获得了大量的DNA系列。这为后来的鉴定和同一认定开启了大门。8天后,凶犯杨某被抓获归案。使DNA进行大量复制第三节DNA的复制沃森和克里克假设,DNA复制是一种复制一、对DNA复制方式的探究全保留复制半保留复制弥散复制(一)提出问题DNA的复制方式怎样?(二)作出假设半保留问题1:DNA肉眼看不见,在实验

2、中应该怎样直观地区分母链和新合成的子链?预测1:如果DNA是半保留复制,复制后得到的子一代DNA和子二代DNA的组成是怎样的?亲代DNA分子可以利用同位素(具放射性)标记的方法(三)演绎推理亲代DNA分子预测2:如果亲代DNA是15N的,放在14N的环境中进行培养,试分析亲代、子一代、子二代DNA中N元素的分布。(含15N的链请用红色表示,含14N的链请用蓝色表示)预测1:如果DNA是半保留复制,复制后得到的子一代DNA和子二代DNA的组成是怎样的?(三)演绎推理15N/14N-DNA(全部)15N/14N-DNA(1/2)14N/14N-DNA(1/2)子一代:子二代:

3、亲代:15N/15N-DNA(全部)预测2:如果亲代DNA是含15N的,放在含14N的环境中进行培养,试分析亲代、子一代、子二代DNA中N元素的分布。(含15N的链请用红色表示,含14N的链请用蓝色表示)子代DNA分子=1母链+1子链(三)演绎推理问题2:事实上,复制后的DNA分子通常是随机混合在一起的,怎样才能验证上面的推测是否正确?15N/14N-DNA(全部)15N/14N-DNA(1/2)14N/14N-DNA(1/2)子一代:子二代:亲代:15N/15N-DNA(全部)可以通过离心使其发生分层(同位素质量不同,15N质量大于14N)亲代DNA分子复制前复制后预测

4、3:如果对亲代、子一代、子二代的DNA都分别进行离心,会分别出现什么结果?(三)演绎推理【学生活动:用阴影带表示离心的结果】子一代:子二代:亲代:15N/15N-DNA(全部)15N/14N-DNA(全部)15N/14N-DNA(1/2)14N/14N-DNA(1/2)预测3:如果对亲代、子一代、子二代的DNA都分别进行离心,其结果有什么不同?15N/15N-DNA重带亲代DNA分子预测3:如果对亲代、子一代、子二代的DNA都分别进行离心,其结果有什么不同?15N/15N-DNA重带15N/14N-DNA中带15N/14N-DNA中带14N/14N-DNA轻带(三)演绎推

5、理重带子一代:中带子二代:轻、中带(四)验证推理材料:方法:过程与结果:大肠杆菌同位素示踪法(+密度梯度离心)①培养②提取, 离心③培养④逐代提取,离心结果验证了:DNA半保留复制作出假设演绎推理验证推理得出结论假说演绎【小结】(二)DNA的复制是半保留复制(三)子代DNA可能的情况及如何设计实验验证这种现象(四)通过实验进行验证(一)DNA的复制方式怎样?提出问题二、DNA复制的过程(一)DNA复制的概念步骤1:1956年,美国生物化学家康贝格在试管中,将大肠杆菌中提取出的解旋酶、DNA聚合酶等酶加入到具有四种丰富的脱氧核苷酸的人工合成体系中。结果:不能合成DNA分子步

6、骤2:康贝格在上述试管中加入了少量DNA分子作为引子,并加入ATP,培养在适宜温度条件下,一段时间后,测定其中DNA的含量。结果:试管中的DNA的含量增加。由此可以推测:DNA的复制至少需要哪些条件?2、原料(游离的4种脱氧核苷酸)1、模板(亲代DNA两条解开的单链)(母链)3、酶(解旋酶、DNA聚合酶等有关的酶)4、能量(二)DNA半保留复制的条件(三)DNA半保留复制的过程思考:(1)复制开始时,DNA的结构会发生什么变化?(2)先解螺旋再复制,还是边解旋边复制?(3)子链形成后,与相同的还是互补的母链形成新的DNA分子?(三)DNA半保留复制的过程解旋以______

7、__为模板进行___________配对形成______________母链碱基互补两个新DNA④盘绕螺旋__链__链子母(四)DNA半保留复制的特点1、解旋复制2、保留复制(子链与的母链形成新DNA分子)边边半互补④盘绕螺旋问题2:为了获知细胞复制的时期,科学家通过生化分析得知,细胞分裂间期细胞中脱氧核苷酸含量开始时很低,不久急剧增加,以后又逐渐降低到初始水平。随着脱氧核苷酸含量的动态变化,DNA聚合酶的活性显著增高。这说明什么问题?(五)DNA半保留复制过程的再探究2、DNA复制发生在细胞分裂期问题1:为了获知细胞复制的场

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