细胞生物学实验报告-鸡红细胞的融合

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1、鸡红细胞的融合实验报告实验原理主要内容实验目的实验用品需要注意的问题1234实验步骤567数据记录及处理结果分析及讨论绘图一、实验目的（1）了解PEG诱导细胞融合的基本原理（2）通过细胞融合实验，初步掌握细胞融合技术二、实验用品（1）器材：生物显微镜、离心机、恒温水浴箱、滴管、离心管、试管架、盖玻片、载玻片、烧杯、吸水纸（2）试剂：0.85%生理盐水、50%PEG、GKN溶液、Alsever溶液（3）实验材料：鸡红细胞三、实验原理同种或异种细胞在一定介质（如病毒、化学因子或电场）的诱导下，可发生细胞间的的融合，形成较大的双核或多核细胞。聚乙二醇（PEG)可与水分子借氢

2、键结合，在高浓度（50%）的PEG的溶液中，自由水消失，导致细胞脱水而发生质膜结构的变化，引起细胞融合，PEG融合技术的关键是要选择合适的相对分子质量（1000~6000）、浓度（30%~50%）以及作用时间。click四、实验步骤（1）鸡血与Alsever溶液按1:4混匀，4℃冰箱中保存（2）取1ml细胞悬液，加Alsever溶液稀释20~25倍（3）取上稀释悬液1ml，加5ml0.85%生理盐水混匀（4）1000rpm离心上述溶液5min，去上清液，重复操作3次（5）第三次离心去上清液后，加GKN0.5ml制成10%悬液，放在37℃水浴箱预热2~3min（6）逐滴

3、0.25ml的50%的PEG溶液，边加边摇匀，37℃恒温静置15min（7）取上述液一滴，盖上盖玻片，镜检五、数据记录及处理观察四个视野中的细胞，记录鸡血细胞融合情况如下表所示视野细胞核总数视野内融合细胞核数2核细胞3核细胞所有细胞核总数所有融合细胞核总数130420105122263013282104313012、数据处理：由上表原始数据得视野内发生融合的细胞核数为12个，视野内所有细胞核总数为105个，由公式：融合率=视野内发生融合的细胞核数/视野内所有细胞核数×100%=12/105×100%=11.4%3、实验结果：鸡红细胞的融合率为11.4%七、结果分析及讨

4、论八、绘图