紫锥菊、黄芪对鸡传染性法氏囊的影响

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1、紫锥菊、黄芪对鸡传染性法氏囊病免疫调控及相关性研究河北农业大学倪耀娣一、研发抗病毒感染中药的意义1病毒性疾病给生命带来严重危害长时期以来，人们一直在为寻求有效的抗病毒药物而进行不懈努力。然而，病毒以其特殊的生物学特性和致病机理致使抗病毒药物研究进展缓慢。2动物病毒性疾病的基本现状★老病未根绝，新病又不断发生；★非典型临床表现，难以确诊与控制；★混合感染性疾病增多；★免疫抑制性病原感染具有潜在性危害；3疫苗保护率不高，免疫失败时有发生基本原因：疫苗质量尚存在一定问题；使用单位运输与保存方法不当；免疫程序有误；不适当

2、使用药物；混合感染免疫抑制性病原的影响等。4因此，在病毒性疾病控制中，研究开发与应用中药具有重要意义。.有利于防控动物病毒性疾病；有利于遏制人兽共患病的传播；有利于保障食品安全；有利于人类社会和谐发展。5研究中药具有重要意义目前金刚烷胺、病毒唑禁用于病毒性疾病，血清治疗也有一定危险，有可能带来了其他的疾病发生。由于中药的成分较复杂，使得病原对某一单一成分不产生耐药性，作用广泛，相对安全，因此中药的应用具有重要意义。6国内研究抗鸡传染性法氏囊病中药方剂黄生大白汤(张秋玲)黄芪、黄连、黄芩、生地、大青叶、白头翁、白术

3、、甘草(煎饮)囊病灵(吴杰)党参、黄芪、银花、冰片等(散剂)等其他复方制剂Echinacea国外紫锥菊属原产于美洲的一类菊科野生花卉，是多年生草本，头状花序单生于茎或枝顶，花朵很大，色彩艳丽。在欧洲，以紫锥菊为原料的产品已连续数年占据年销量第一的位置。紫锥菊的免疫活性受到国内外的普遍重视，尤其在 德国和法国，紫锥菊及其制剂已成为家庭常备药。目前在欧美广泛应用于药品、营养补充剂和保健食品。黄芪为豆科植物膜荚黄芪Astra-galusmembranaceus(Fi-sch.)Bge.及内蒙古黄芪A.monghol-i

4、cusBge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao.的根。生用或蜜炙用。【性味与归经】甘，温。归肺、脾经。【功能】补气升阳，益卫固表，利水消肿，托毒排脓，敛疮生肌。黄芪对正常机体的抗体生成功能有明显促进作用。黄芪多糖对创伤小鼠具有很好的免疫保护作用。Radixastragali7本实验研究的目的意义7.1、目前国内研究中药治疗病毒性疾病虽然不少，但对中药作用机理研究不多，而且方剂多半都是很多中药配合组方，实际操作很麻烦。引种紫锥菊及其成分能否作为免疫调节剂原料使用畜禽，还缺乏相关的实验研究作支持。

5、7.2本试验从国内选中具有免疫增强作用黄芪作做配伍，以引种紫锥菊为研究对象，并与中药方剂作对比，对其免疫调节作用的机理及物质基础进行了深入的研究，以期为开发利用引种紫锥菊资源提供翔实的实验依据。二、研究目标、研究内容及拟解决的关键性问题1研究目标本试验通过人工感染IBDV的方法，对试验鸡口服紫锥菊、黄芪合剂前后生理生化及免疫指标进行探讨，从而确定紫锥菊、黄芪提取物治疗鸡法氏囊病的确切预防治疗效果，进一步为开发新型免疫增强剂以及中药广泛应用于禽病毒性传染病提供一定的理论依据。2研究内容紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病

6、鸡预防治疗的最佳剂量紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡免疫器官的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的生理生化指标的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的血液中免疫球蛋白的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的组织间CD4+、CD8+T淋巴细胞的影响3拟解决的关键性问题（1）病理模型的建立（2）法氏囊病毒RNA的提取及确定（3）紫锥菊、黄芪提取物对鸡法氏囊病的治疗效果及测定指标的综合分析三、拟采取的研究方法、技术路线、试验方案及其可行性分析1研究方法1.1病毒的传代1.2建立病理模型1.2.1IBDV的EID50（鸡胚半数

7、致死量）的测定1.2.2人工感染病理模型的建立1.2.3发病标准判断1.3实验动物分组及处理1.4紫锥菊、黄芪提取物对人工感染IBDV雏鸡发病率和死亡率的影响1.5用物理方法测定免疫器官发育指数1,6用相应试剂盒及全自动分析仪测定血液生理生化指标1.7用比浊法测定血清免疫球蛋白含量1.8采用免疫组化的方法测定组织器官内CD4+、CD8+T淋巴细胞的含量2技术路线病毒的传代人工感染IBDV雏鸡模型的建立IBD发病率、死亡率和免疫器官指数的测定免疫器官指数的测定发病率、死亡率的测定外周血液中CD4+、CD8+的测定组

8、织器官中CD4+、CD8+的测定免疫球蛋白IgM、IgA、IgG的测定对T、B淋巴细胞的影响生理生化指标的测定紫锥菊、黄芪提取物对人工感染IBDV雏鸡免疫功能的调控作用RT-PCR检测病料组织中IBDV谷草转氨酶，谷丙转氨酶、碱性磷酸酶血清总蛋白、白蛋白含量测定超氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶等结果及数据分析3试验方案3.1病毒的传代3.2建立病理模型(1)IBDV的EID