结核杆菌的研究进展

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1、结核杆菌的最新研究进展CompanyLogo结核杆菌的介绍1结核杆菌诊断技术研究进展2CompanyLogo结核杆菌的介绍自从1882年RobertKoch发现结核分枝杆菌(MTB)以来，已报道的分枝杆菌有100多种。有关分枝杆菌的分类方法很多，通常分为典型结核分枝杆菌(TM)和非结核分枝杆菌(NTM)。TM包括人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌、非洲结核分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，又称为结核分枝杆菌复合群(MTBC).该群中DNA相关性为85％一100％，分类地位相近。NTM包括MTBC和麻风分枝杆菌以外的所有其

2、他分枝杆菌，在自然界中分布广泛，由于NTM对氯化物具有抗性，它们甚至可以在自来水管道系统中生存。CompanyLogo结核是由MTBC中的细菌引起的人畜共患传染病，近年来在全球的发病率逐年上升，特别是发现了由牛结核分枝杆菌引起的人类结核和由MAC引起的肺炎有增多的趋势，已成为值得关注的公共卫生问题。研究表明，结核病牛可通过痰液、乳汁、粪便等向外排出结核杆菌污染环境。因此，动物检疫是控制结核病的重要环节。结核是一种慢性消耗性疾病，每年引起全球约300万人死亡。20世纪80年代后结核病的发病率曾有所降低，但近年其全

3、球疫情又呈现上升趋势，而且由于结核分枝杆菌耐药性和多重耐药菌株的出现，结核病对某些国家已构成严重的健康威胁。因此，对结核杆菌的研究非常重要。结核杆菌的介绍CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展结核杆菌诊断技术研究进展一、细菌学检测结核病人的细菌学检测是结核病诊断、治疗及评价治疗效果的可靠手段。在过去的20年中，针对结核分枝杆菌的早期感染已经建立了一系列快速检测系统。1、全自动分枝杆菌检测系统（BACTEC）该法采用放射同位素技术对细菌的生长进行自动检测。该法检测的阳性率比L-j法提高了10％，但其局限性

4、在于无法观察菌落形态、容易污染、有放射性及价格昂贵。CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展2、分枝杆菌生长指示系统(MGIT)MGIT系统是继全自动分枝杆菌检测系统(BACTIEC)检测系统之后发明的一种非放射性培养法，包括MiddleBrood7H9液体培养基和分枝杆菌生长指示剂，该指示剂在有氧条件下发生荧光淬灭。当培养基中分枝杆菌生长代谢逐渐消耗氧时，培养基的氧化还原电势降低，指示剂发出荧光．这样可通过紫外线透射仪观察，分枝杆菌生长所产生的荧光在气液面及试管底部呈橙色即为阳性结果。CompanyLo

5、go结核杆菌诊断技术研究进展3、MB／BacT系统MB／BacT系统是由德国Heipha—Biotest公司生产的一种液体培养基系统，该系统对标本中结核分枝杆菌复合群(MTBC)初代分离率高于全自动分枝杆菌检测系统(BACTE)TB460，可以通过肉眼观察到细菌生长，且无放射性污染.但不能用于分支杆菌的菌型鉴定。CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展4、噬茵体报告技术该技术原理为，萤光素酶指示的分枝杆菌噬菌体与在含抗结核药物培养基中短暂培养的待检菌混合后，能感染活的耐药菌，使之表达萤光素酶基因，再加入萤

6、光素底物，活菌会产生荧光，而敏感菌无荧光产生。此办法直观性高、用时短，但如要被广泛应用于结核杆菌的快速检测还需要进一步的探索．必须使用标准化的细菌、标准化的萤光素酶系统，以及标准化的培养基和发光检测仪，并能与用常规方法所测最低抑菌浓度值相符。CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展二、血清学检测多数血清学实验检测时间短，具有较高的特异性。可用于人群筛选。但日前已商品化的组合抗原检测试剂盒都无法检测出所有结核患者血清中的抗结核抗体。结核分枝杆菌抗原多且复杂，在宿主体内表达的数量、种类或时机可能随患者的个体

7、免疫背景和病程而异，从而表现出不同的抗体谱。因此，采用多种抗原联合检测的手段，在保证特异性的基础上有助于改善灵敏低的缺点。CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展1、酶联免疫吸附法由于酶联免疫吸附法(ELSA)简使、易行、快速、无需特殊精密仪器，所以在结核病血清学诊断方面研究最多、应用最广。CompanyLogo2、斑点金标免疫渗滤法斑点金标免疫渗滤法(DIGFA)是将固相人型结核分枝杆菌蛋白衍生物(PPD)纯化抗原包被在斑点反应板上，其与体液中的抗结核分枝杆菌抗体(PPD—IgG)形成复合物．胶体金

8、标记抗人IgG或海藻硫酸多糖(SPA)与复合物结合，形成肉眼可见的红色斑点。这种方法具有简便、快速、结果易于判读、无需特殊仪器、能进行单个标本的测定、受检患者可及时得到结果等特点。但受结核菌或其他分枝杆菌感染及卡介苗接种等影响，可能出现交叉反应。结核杆菌诊断技术研究进展CompanyLogo结核杆菌诊断技术研究进展3、结明实验结明实验(MycoDot)是国内外使用较早、较普遍的结核抗