酶工程思考题(附答案)

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1、酶工程思考题汇总第一章P251．何谓酶工程?试述其主要内容和任务.酶的生产，改性与应用的技术过程称为酶工程。主要内容：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。主要任务：经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。2．酶有哪些显著的催化特性？专一性强（绝对专一性——钥匙学说、相对专一性——诱导契合学说）、催化效率高、作用条件温和3．简述影响酶催化作用的主要因素.底物浓度、酶浓度、温

2、度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素第二章P635．酶的生物合成有哪几种模式？生长偶联型（同步合成型、中期合成型）、部分生长偶联型（延续合成型）非生长偶联型（滞后合成型）7．提高酶产量的措施主要有哪些？a.添加诱导物（酶的作用底物、酶的催化反应物、作用底物的类似物）b.控制阻遏物的浓度c.添加表面活性剂d.添加产酶促进剂11．固定化微生物原生质体发酵产酶有何特点？1.提高产酶率2.可以反复使用或连续使用较长时间3.基因工程菌的质粒稳定，不易丢失4.发酵稳定性好5.缩短发酵周期，提高设备利用率6.产品容易分离纯化7.适用于胞外酶等细胞产

3、物的生产第三章P843．植物细胞培养产酶有何特点？1.提高产率2.缩短周期3.易于管理，减轻劳动强度4.提高产品质量5.其他4．简述植物细胞培养产酶的工艺过程。外植体细胞的获取细胞培养分离纯化产物6．动物细胞培养过程中要注意控制哪些工艺条件？1.培养基的组成成分2.培养基的配制3.温度的控制4.ph的控制5.渗透压的控制6.溶解氧的控制第四章P1351．细胞破碎的方法主要有哪些？各有何特点？机械破碎法：通过机械运动产生的剪切力，使组织、细胞破碎（捣碎法，研磨法，匀浆法）物理破碎法：通过物理因素的作用（温度差破碎法，压力差破碎法，超声波破碎法

4、）化学破碎法：通过化学试剂对细胞膜的作用（添加有机溶剂，添加表面活性剂）酶促破碎法：通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的催化作用，使细胞外层结构受到破坏（自溶法，外加酶制剂法）2．试述酶提取的主要方法。1.盐溶液提取2.酶溶液提取3.碱溶液提取4.有机溶剂提取3．简述酶沉淀分离的原理与特点？沉淀分离法分离原理盐析沉淀法等电点沉淀法有机溶剂沉淀法复合沉淀法选择性变形沉淀法利用不同蛋白质在不同的盐浓度下溶解度不同的特性，通过在酶液中添加一定浓度的中性盐，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离利用两性电解质在等电点时溶解度最低，以及不同的两性

5、电解质有不同的等电点这一特性，通过调节溶液ph，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离利用酶与其他杂质在有机溶剂中的溶解度不同，通过添加一定量的某种有机溶剂，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离在酶液中加入某些物质，使它与酶形成复合物而沉淀下来，从而使酶与杂质分离选择一定的条件使酶液中存在的某些杂质变性沉淀而不影响所需的酶，从而使酶与杂质分离8．酶结晶的主要方法有哪些？1.盐析结晶法2.有机溶剂结晶法3.透析平衡结晶法4.等电点结晶法第五章P1571.试述酶分子修饰的概念和作用。概念：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变

6、，从而改变酶的催化特性的技术过程作用：可以使酶分子结构发生某些合理的改变，有可能提高酶的催化效应、增强酶的稳定性、降低或消除酶的抗原性、改变酶的底物专一性等。同时还可以研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响，进一步其结构与催化特性之间的关系。6.简述定点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的应用。主要技术过程：1.新的酶分子结构的设计2.突变基因碱基序列的确定3.突变基因的获得4.新酶的获得应用：该技术是氨基酸置换修饰和核苷酸置换修饰的常用方法。7.酶分子物理修饰有何特点？不改变酶的组成单位

7、及其基团，酶分子的共价键不发生改变，只是在物理因素的作用下，副键发生某些变化和重排，使酶分子的空间构象发生某些改变。第六章P1811．举例说明常用的固定化方法。1.吸附法2.包埋法（凝胶包埋法、半透膜包埋法）3.结合法（离子键结合法、共价键结合法）4.交联法5.热处理法2．何谓固定化酶？固定化酶的特性与游离酶比较有哪些改变？固定化酶：指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。它既保持了酶的催化特性，又克服了游离酶的不足之处，具有提高酶的催化效率、增加稳定性、可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等优点。5．简述固定化原生质体的

8、制备方法与特点。制备方法：1.琼脂—多孔醋酸纤维素固定化法2.海藻酸钙凝胶固定化法3.角叉菜胶固定化法4.光交联树脂固定化法特点：1.保持了细胞原有的新陈代谢特性2.增加了细胞膜