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《昆虫与哺乳动物蛋白质N_糖基化修饰异同的比较及其潜在的应用意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·综述·中国蚕业ZHONGGUOCANYE昆虫与哺乳动物蛋白质N-糖基化修饰异同的比较及其潜在的应用意义1,21111,2韦亚东牛淼淼刘子瑜车凤玉张国政(1江苏科技大学,江苏镇江212018;2中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018)摘要基于过去多年来所积累的关于昆虫蛋白质糖基化修饰的研究成果,对昆虫与哺乳动物的蛋白质N-糖基化修饰途径与分子机制的异同进行了比较分析,同时进一步讨论如何在人们前期研究的基础上,对昆虫杆状病毒表达系统的蛋白质糖基化修饰途径做些改造性工作,以期能够直接利用该昆虫杆状病毒表达系统生产人源化糖蛋白。关键词昆虫;哺
2、乳动物;杆状病毒;表达系统;N-糖基化修饰;人源化糖蛋白中图分类号S881.2文献标识码B文章编号1007-0982(2011)02-0008-06自20世纪80年代以来,人们对昆虫杆状病毒关。目前的研究结果表明,昆虫的糖基化修饰和高[6]表达系统进行了全面的研究并表达了大量的重组蛋等动物的不同。哺乳动物的糖蛋白是具有唾液[1]白。该表达系统包括作为表达载体的重组病毒酸末端的杂合型N-糖链构型,而昆虫细胞表达的糖和作为病毒繁殖宿主的昆虫细胞或虫体,外源基因蛋白糖链具有非常简单的侧链,是低甘露糖型,并且[7]的表达是利用重组病毒非常强的病毒晚期基
3、因启动含有对人类具有过敏反应的核心α-1,3连接的岩子,如polyhedrin或p10等,协同病毒转录复合体完藻糖。这些糖链结构的差异,极大地限制了昆虫杆[2]成的。基于该表达系统除了能够以非常高的水状病毒表达系统在人类医药上的应用。因此,正确平表达外源基因外,还能够容纳很大的外源基因的认识、分析比较昆虫与哺乳动物的蛋白质N-糖基化插入表达,是一个很好的表达多亚基功能蛋白的平修饰途径及其分子机制的不同,对改造昆虫杆状病[3]台。同时,对人或动物具有相对的生物安全性。毒表达系统糖基化修饰途径,表达人源化糖蛋白具因此,人们逐渐把它作为基因治疗及应用
4、该系统将有非常重要的必要性。本文对昆虫与哺乳动物蛋白[4]外源基因引入哺乳动物细胞或组织的重要工具。质N-糖基化修饰途径中的糖链修饰的起始、核心糖在昆虫杆状病毒表达中,当病毒载体进入宿主链剪接加工、侧链岩藻糖化、核心糖链分枝与延长及细胞,宿主自身的基因表达基本上全面停止,细胞内其分子机制异同进行比较分析如下。的蛋白质合成系统转向合成表达病毒基因,包括插1昆虫和哺乳动物糖蛋白的N-糖链修饰的起始及入的外源基因。作为杆状病毒宿主的昆虫是真核生核心糖链剪接加工的差异物,细胞能够以多种复杂的方式对合成的蛋白质进行后修饰,表达的重组蛋白在细胞内被折叠、修
5、饰、真核生物的蛋白质糖基化修饰过程通常在内质[5]运输组装成最终的功能蛋白。其中,N-糖基化是网和高尔基体内进行的。初始阶段,事先在一系列蛋白质翻译后修饰中非常重要的一种,与蛋白质的酶的作用下组装好的寡糖复合前体,转运到新生肽正确折叠、生物半衰期及生物功能正常发挥息息相的糖基化保守序列的氨基酸上。随后的初始糖链在糖苷酶的作用下进行糖链的剪切和在糖基转运酶作收稿日期:2010-12-01;修回日期:2011-03-03用下的糖链加工,形成了一个小的糖链核心结构。作者简介:韦亚东(1969—),男,山东莒南,博士,副研究员。在不同的物种中,这个糖链
6、核心结构能够通过不同Tel:0511-85616587,E-mail:yadongww@yahoo.com的后续途径,进一步分枝和延长成最终的成熟糖蛋82011年第2期韦亚东等:昆虫与哺乳动物蛋白质N-糖基化修饰异同的比较及其潜在的应用意义·综述·白的带有侧链的寡糖糖链。N-糖链修饰的起始及核昆虫的蛋白质N-糖基化修饰的起始和哺乳动心糖链的形成,在昆虫和哺乳动物细胞内的途径是物类似,就是一同将寡糖前体物从Glc3Man9Glc-[8]基本一致和相似的。NAc2-PP-Dol转移到新生肽链的N-糖基化位点的天[7]研究比较清楚的哺乳动物的蛋白质糖
7、基化过程冬酰胺上。这个结论已经被昆虫细胞中的N-糖[16]是起始于寡糖转运酶的作用。寡糖转运酶是存在于链和脂质体连在一起所证实。昆虫和哺乳动物内质网中的一个多亚基的蛋白酶,它将事先组装好细胞内从Glc3Man9GlcNAc2去除掉末端的葡萄糖的的Glc3Man9GlcNAc2寡糖,从寡糖载运脂体转运至途径也是一致的,但昆虫体内编码α-葡萄糖苷酶I[9]新生肽的糖基化识别位点(Asn-X-Thr/Ser)上。和α-葡萄糖苷酶II的基因还没有被克隆出来,不过[17][18]紧接着内质网膜上的α-葡萄糖苷酶I,将最外末端通过酶抑制剂和N-糖链的分析,
8、能够证实鳞[10]的α-1,2连接的葡萄糖去除掉。另外的内质网翅目昆虫细胞存在这2个酶的活性。另外,在鳞翅膜上的α-葡萄糖苷酶II去除掉第2个α-1,
