显微镜使用与维护

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1、光学显微镜的分类和基本构造光学显微镜的使用与维护光学显微镜的分类∑正置显微镜∑倒置显微镜∑体视显微镜中国显微图像网∑图像采集处理分析系统（略）技术部正置显微镜的基本结构倒置显微镜的基本结构1-主机机身11-反射光光路1-图像采集接口2-目镜2-开关12-反射光光源3-图像采集接口3-透射光源13-反射光滤色片4-图像采集接口4-视场光阑14-反射光视场光阑5-光路转换棱镜6-侧口棱镜5-移动尺15-荧光滤色块支架7-中间棱镜6-聚光镜16-观察筒8-检偏器7-样品夹17-视频出口9-反射滤色块10-

2、荧光视场光阑8-物镜18-目镜11-荧光孔径光阑9-物镜转盘19-调焦机构12-滤色片滑块10-滤色片13-高压汞灯14-卤素灯15-视场光阑16-起偏器17-孔径光阑18-聚光镜19-物镜体视显微镜基本结构体视镜使用说明1-主机变倍体1.打开光源2-物镜2.将样品放在载物台上，低倍下找到样品并调焦清晰3-观察筒3.调节变倍旋钮至所需要放大的倍数4-变倍旋钮4.适当调节照明角度5-调教旋钮5.选择其他的观察方式（透射、暗视野、透射斜照明、落射6-调焦立柱斜照明、环状照明、同轴照明等）7-目镜8-载物

3、台9-底座10-冷光源11-鹅颈光纤1显微镜的调试∑光学部分1.打开透射光开关，将一张白纸放在视场光阑上，检查是否必配：目镜、物镜、聚光镜。有光通过。正常情况下在白纸上可见一光斑。选配：环状光阑、起偏器、检偏器、DIC棱镜、荧光光路等特殊观察方法的附件。2.把视场光阑达到最大，白纸上的光斑直径达到最大。（如右图）3.现在将白纸放到载物台上，把聚光镜的孔径光阑开到最5.在这之后调节观察筒的高度（如果可调）大，光斑会变大变亮。（如左图）4.调节聚光镜的粗调机构，把聚光镜的位置调节到样品下方的1-3毫米处

4、。（如右图）在这之后调节观察筒的瞳距到最佳位置。调节目镜屈光度至适应位置。26.在镜下观察，用移动尺移动7.科勒照明的调节样品，并且上下调节粗调直到（1）关小视场光阑，上下调节聚光镜的位置直至可以看到一可以在目镜中看到所要观察的个边缘锐利的视场光阑的像（或者是视场光阑一个边锐利样品，调节微调使样品图像锐的像。利清晰。这时您看到的图像并非最理想，还需要进行科勒照明的调节。（2）调节聚光镜两侧的旋钮，把视场光阑的像调到中心（3）视场光阑要根据物镜倍数来适当调节。位置。内接多边形外接多边形特殊观察方法的调

5、节相差的使用与调试8.最后一步是调节聚光镜的孔径光阑。孔径光阑最适合1.首先要选用相差物镜的位置是物镜的数值孔径乘以(0.6-0.8)。2.将聚光镜内与物镜适用的环状光阑转到光路内。孔径光阑开启过大孔径光阑合适位置明场相差3相差的调节a.库勒照明调整好，用明视野方法把样品调焦清晰；c.拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，并调焦于视b.把聚光镜转到Ph1/2/3对准转盘刻度线位置，选用10×/野中的两个相差环上（物20×/40×/100×相差物镜。镜的黑色相差环和聚光镜的透光相差环）；d.视野中的两个相

6、差环不一定重合，调节聚光镜上的相相两个调节装置，使透光环差差作前后左右移动而与黑环物镜聚重合；光e.调整好后，换回观察用目镜，将绿色滤光片按入光镜路中，即可观察到样品的相差像微分干涉显微镜结构微分干涉的调节（DIC）a.把起偏器（polarizer）摆入照明光路中；把聚光镜转盘转到与物镜对应使用的位置上，即罗马数字I、II、III；在物镜后方或物镜转换器上插入物镜专用的DIC插片（DICslider）；把检偏器（analyser）插入成像光路中；b.调节DIC插片，使微分干涉相衬的像达到最佳效果，也

7、c.同时可调节聚光镜的孔径光阑，使反差的效果也达到最佳；就是浮雕效果最为明显；d.然后再细微调样品的细节，可见样品中不同层面上的结构e.调节视场光阑消除眩光聚光镜的孔径光阑4荧光的观察3.关闭透射光，打开落射荧光。1.开启荧光电源2.选择荧光物镜荧光中心的调节4.选择相应的滤色块。每次更换完新的汞灯灯泡后都要进行重新校准5.调节光阑1.拔出汞灯中心调节附件2.调节聚焦旋钮（6）使汞灯的像和镜像清晰，如图A3.使用工具调节像的位置，使两个像呈现C图效果，靠近但不重叠，此时的荧光最强且均匀。4.插入汞灯

8、调节附件，镜下观察如图D时，校准完成。显微镜的清洁与维护首先使用吹气球吹掉光灰尘存在的位置1.物镜顶透镜的表面学元件表面灰尘2.数码相机感光芯片和保护层使用长纤维脱脂棉棉签蘸3.盖玻片的双面取少量清洗液（乙醚：酒精4.载玻片的表面=7：3）5.数码相机接口的光学元件表面6.聚光镜前端透镜的表面7.目镜的内外表面和目镜测微尺的表面8.光源外表面保护玻璃的表层从光学元件的中心向外旋转擦拭，9.光路的其他玻璃表面（灯泡、滤光片、分光镜等）如左图。5