发芽黄豆_淀粉酶活力的测定与比较_靳利娥

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1、检测技术发芽黄豆β-淀粉酶活力的测定与比较靳利娥吕光成(太原理工大学化学工程与技术学院太原·030024)摘要：实验对豆类β-淀粉酶的最佳活力的条件进行了选择和比较。结果表明，在研究的豆类中黄豆的β-淀粉酶含量较高；通过对黄豆发芽前后β-淀粉酶活力的比较发现，发芽第3d中黄豆的â-淀粉酶活力最高；发芽黄豆β-淀粉酶活力为最大的条件是：pH5.7~6.6、温度40~50℃、最佳提取时间1.5~2.0h。关键词：β-淀粉酶；活力；测定；黄豆中图分类号：TS207文献标识码：A文章编号：1005-9989(2004)

2、06-0082-03Determinationandcomparisonofactivityofβ-amylasefromthegerminatedyellowbeanJINLi-eLVGuang-cheng(ChemicalEngineeringandTechnologyCollege,TaiyuanUniversityofTechnology,Taiyuan,030024)Abstract:Theconditionofthemaximumactivitywasoptimizedforβ-amylaseofs

3、omebeans.Theresultsshowedthattheconcentrationofβ-amylasefortheyellowbeanishigherthanthatofotherbeansselectedinexperiments.Theextractivetimeis1.5h,pH5.7,andthetemperatureis40℃.Inaddition,theexperimentcomparedtheactivityofβ-amylaseforthegerminatedyellowbeanand

4、nogerminatingyellowbean.Keywords:β-amylase;activity;determination;yellowbean[1-5][1]报道。1995年，邱宏端等对高等植物中β-淀0前言粉酶利用水提法进行了研究，提取的β-淀粉酶与异淀粉酶又称糖化酶，广泛存在于植物(如大麦、淀粉酶协同作用酶解木薯，产生的麦芽糖浆含量可山芋、大豆等)及一些微生物中。按照结构的差异，达70%~75%；1987年，LehmussaariAntti,[5]可将其分成α、β型两大类。其中，植物中主要存Man

5、sikkamakiAino提出植物原料中的β-淀粉酶在β-淀粉酶。β-淀粉酶的作用是从非还原性末端相当一部分与谷物的蛋白质和其他成分结合在一顺次切下麦芽糖，是“外切”型糖化酶。在制备饴起，如从植物原料中获得大部分的β-淀粉酶，水溶糖、啤酒、饮料等工业生产过程中，β-淀粉酶可作剂中要添加含硫的还原剂或其他物质。黄豆中不仅含为糖化剂；在结晶麦芽糖及麦芽糖醇时也需要较纯有大量的蛋白质、脂肪，还含有丰富的β-淀粉酶，净、高活力的β-淀粉酶。因此，β-淀粉酶在食品、多数学者报导了关于黄豆β-淀粉酶的生化性质和酿造、粮食加

6、工及医药等行业具有重要的作用。物化性质,而对黄豆发芽前后β-淀粉酶活力的变化、从植物中提取β-淀粉酶，国内外已进行了一些以及β-淀粉酶失活的规律等在文献中尚未见报导。本实验对豆类β-淀粉酶的活力进行了选择和比较，收稿日期：2004-01-14对黄豆发芽前后β-淀粉酶的活力进行了研究，确定了作者简介：靳利娥(1964-)，女，主要从事食品方面的研究及生物化学的教学工作。最佳提取时间及β-淀粉酶失活的规律，为酶的进一82No.6.2004检测技术步纯化、制剂的生产提供科学的帮助。碎后以2000r/min离心10mi

7、n，用布氏漏斗抽滤分离所得酶液，操作温度选定为室温(18℃)。1实验内容1.3.3â-淀粉酶的活力测定酶活力是通过测定酶1.1实验药品与材料促反应过程中单位时间内，单位体积中底物的减少黄豆、绿豆、红小豆、蚕豆：市售；1%(wt%)量或产物的增加量，即测定酶促反应的速率来获得可溶性淀粉溶液；2%(wt%)麦芽糖标准溶液；pH6.8的。一般来说，任何一个酶的催化反应，如果底物的磷酸缓冲液。或产物具有光吸收、旋光、电位差改变或荧光的变1%(wt%)3,5-二硝基水杨酸试剂：将1.00g3,5-化等性质，只要方法足够灵

8、敏，就可以直接加以检[7-8]二硝基水杨酸溶于20mL2mol/LNaOH溶液和50mL测。水中，加入30g酒石酸钾钠定容至100mL。本实验是通过淀粉在β-淀粉酶的催化作用下1.2实验仪器可生成麦芽糖，利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基可调电热器；分光光度计：721型，长征光学水杨酸试剂反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，元件厂；酸度计：pHS-25型，上海雷磁仪器厂；电测定其吸